英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

基本方案2  蛋白A交联琼脂糖凝胶亲和层析 蛋白A 通常用于人（除lgG3外；小鼠lgG1 结合力也较弱）、兔、豚鼠和猪抗体的纯化。 材料 腹水或MAb 上清 PBS, pH8.0 和pH 7.3 1mol/L NaOH 蛋白A 交联琼脂糖凝胶CL-4B 0.1mol/L 柠檬酸， pH 按照所分离的抗体亚类的需要而定（步骤3) 10% (m/V) NaN3 …

基本方案1 硫酸铵沉淀和凝胶过滤层析 硫酸铵沉淀可纯化小鼠抗体的所有亚类和其他种属抗体，本方案也可用于纯化任何种属的lgM 、lgG 和lgA 材料 腹水或MAb 上清 PBS 饱和硫酸铵(SAS) 硼酸盐缓冲液（可选） 聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶S-200 Superfine (Pharmacia Biotech) 含有0. 02% (m/V) NaN3 的PB …

材料（其他材料见单克隆细胞培养上清的制备) 含有5~10mmol /L HEPES 的DMEM 完全培养基和DMEM- 10 完全培养基，pH 为7.2~7. 4 70% (V/ V) 乙醇 FBS 10% (m/V) 叠氮钠，可选的 850cm2 滚筒式培养瓶和滚简装置，37°C 250ml 塑料锥底离心管，无菌 离心机转子 0. 45μm 过滤装置，可选 …

材料 杂交瘤 DMEM-10 完全培养基 175 cm2 组织培养用细颈瓶 50ml 塑料锥底离心管，无菌 离心机和转子 过程 1. 将杂交瘤细胞移入含有DMEM-10 完全培养基的175 cm2 培养瓶中。培养至生长旺盛和准备细胞分瓶时取用（细胞密度应达到 1X106 ~ 2X106 个细胞／ml) 。避免细胞生长密度过高导致死亡。 2. 以1 : 10 …