2024年 3月 19日, 星期二
新闻

细胞培养

单层细胞的培养

材料 装在冷冻培养瓶中的细胞: BS-C-1  、CV-1  、HuTK- 143B 或BHK-21 细胞 70% (VIV) 乙醇 起始和维持培养基(表1) , 37°C PBS (可选) 胰蛋白酶/EDTA: 0. 25% (m/V) 胰蛋白酶/0. 02% (m/V) EDTA, 37℃ 25 cm2和150 cm2组织培养瓶 湿润的、37°C 、5% …

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肿瘤细胞的原代培养

由于不同人种、不同民族的遗传基因不同,所以对不同疾病, 特别是对复杂疾病的易感性、对各种药物的耐受性和对各种环境因子的反应也不同,建立国人肿瘤细胞株, 可为国人疾病的诊断、防治及药物开发提供肿瘤模型。 (一)材料与设备 1. 无菌材料眼科剪,眼科镂, 一次性培养皿,细胞培养瓶T25 、T75 , 冻存管,一次性小滤器, 一次性离心15~50ml, 高糖DME …

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细胞培养类型的分类:根据生长习性分类

根据细胞在液体或半固体培养基中的生长情况分类,生长特征只是功能上的描述,并与细胞来源有关。 悬浮和贴壁生长是细胞的特性和培养条件,有些细胞可以以两种方式进行。   图1 制备分泌抗特定抗原X 的单克隆抗体的杂交瘤细胞筛选培养基中加入了氨甲啋呤抑制剂,可以抑制核昔酸正常生物合成的药物,所以细胞必须采用其他途径合成核酸,而只有杂交瘤细胞株可以采取这种途径合成核昔 …

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改良的Boyden 小室法观察细胞的的运动性

该方法常用来检测白细胞和巨噬细胞的趋化性,后经改良用于肿瘤细胞运动性、侵袭性等的测定。Boyden 小室由上、下两个室组成,两室中间由带微孔的滤膜分隔,也可用鸡胚尿囊膜、人胚胎羊膜等分隔。待测细胞放在上室, 其运动性通过测量滤膜上层到运动最远的细胞之间的距离而确定。也可以计数在滤膜不同平面上细胞数、滤膜底部的细胞数或是另一张在下室的滤膜上细胞数。当上下两室均 …

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不同类型细胞的生长形态

贴壁细胞 正常情况下观察到的细胞应该是规则均匀分布在培养皿底面上的一层细胞。每种细胞都有其自身的形态特征:球形、三角形、方形、长形等等。细胞的生长方式有些像鹅卵石铺成的路面、有些呈液涡状、有些是随机形态、而有些则覆盖了另一些细胞。 在单个细胞中能够发现一个比较暗的圆形细胞核,其内还有更暗的核仁。有时核仁大得把细胞质挤成很小的一块。分裂时期细胞核可能成半球状或 …

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细胞冻存的7个注意事项

一、细胞冻存 方法: 冻存液最好现配:按1:3:6(或1:2:7) 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态量好的细胞进行冻存处理, 对于贴壁细胞: 1 吸出旧培养液加PBS冲洗一次 2胰酶消化 3加培养基中止消化,有的细胞是加血清中止 4离心收集细胞,不同细胞离心率不一样(以上仅为贴壁细胞,悬浮细胞收 …

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小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤

小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤: 1、  于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠脑; 2、  预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块; 3、  移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培养箱中消化30min; 4、&nb …

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人胚胎肺成纤维细胞的培养

成纤维细胞作为体外最易培养成功的正常细胞,用途广泛。但由于其有限的传代寿命,通常用于细胞衰老的研究,在肿瘤研究中,常常作为正常细胞对照,用于研究细胞恶性转化的条件和影响因素。另外, 它也常用于药物毒性的检测。体外培养的成纤维细胞, 还用于疾病的诊断,如染色体异常疾病的筛选、先天性代谢遗传疾病的细胞化学及生物化学检验和鉴定。 (一)材料与设备 1.设备   超 …

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人胚眙肝细胞的培养

随着各型肝炎、肝硬化、肝癌等慢性肝病的发病率日益升高,体外培养的肝细胞也被广泛地用千肝病基础研究中。尽管细胞培养技术不断改进和成熟,国内外也先后建立了多株人肝癌细胞系,但体外分离和培养人正常肝细胞仍是非常有价值的研究材料。 (一)材料与设备 1. 设备与器材   超净工作台、离心机、CO2 培养箱、-70℃ 冰箱、-20℃冰箱。2. 无菌材料   大培养皿、 …

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细胞的支原体检测——荧光指示细胞法

常见的支原体检测方法中最简单、最经济的方法是荧光指示细胞法。该方法使用的荧光染料是烟酸己可碱,其激发波长为350nm(紫外激发),发射波长为420nm。该染料会结合到DNA 中富含A-T 的区域,由于支原体的DNA中A-T 含量占多数(55%~80%),所以可被染色而检测到。支原体污染的细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原 …

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