英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
一、文献标题
FBXW7 suppresses gastric cancer development and progression via ubiquitination-mediated degradation of MMP2
FBXW7 通过泛素化介导的 MMP2 降解抑制胃癌的发生与发展
二、概要及实验亮点
该研究围绕胃癌（gastric cancer, GC）肿瘤微环境中的基质重塑与翻译后调控机制展开
结论：FBXW7 作为 E3 泛素连接酶，通过泛素化介导 MMP2 降解，抑制胃癌进展。FBXW7-MMP2 轴可作为胃癌潜在的预后标志物和治疗靶点。
实验亮点
- 多组学整合：结合 scRNA-seq、TCGA-STAD、GSE150290、组织芯片 IHC、功能实验、Co-IP、免疫荧光、TSA、LC-MS、泛素化实验和裸鼠移植瘤模型，系统解析 MMP2 在胃癌中的细胞来源、功能与调控机制。
- 首次揭示 FBXW7-MMP2 轴：首次报道 FBXW7 作为 E3 泛素连接酶，通过 K48 连接的多聚泛素化介导 MMP2 蛋白酶体降解，填补了 MMP2 翻译后调控在胃癌中的空白。
- 单细胞分辨率定位 MMP2 来源：明确 MMP2 主要来源于 UF 和 myCAF 亚群，而非均匀表达，提出 UF 作为过渡态 CAF 的模型。
- 体内验证充分：使用 Engreen 体内转染试剂实现质粒在裸鼠体内的递送，成功验证 FBXW7 对 MMP2 驱动肿瘤生长的抑制作用。
- 临床相关性明确：MMP2 高表达与不良预后相关，FBXW7 与 MMP2 表达负相关，支持两者作为预后标志物的潜力。
三、采用英格恩（Engreen）产品的实验部分
文中明确提到使用英格恩（Engreen，北京）产品的实验为 动物体内转染实验，具体位于 2.3 Animal experiments 部分：
“Briefly, cholesterol-modified OE-NC, OE-MMP2, or OE-MMP2 + OE-FBXW7 were mixed with an in vivo transfection reagent (Engreen, Beijing, China) and dissolved in sterile saline to a total volume of 25 μL per mouse. Each nude mouse received multiple intramuscular injections at 1-day intervals.”
即：
- 将胆固醇修饰的 OE-NC、OE-MMP2、OE-MMP2 + OE-FBXW7 质粒与 Engreen 体内转染试剂 混合；
- 溶于无菌生理盐水，每只小鼠总体积 25 μL；
- 每只裸鼠接受多次肌肉注射，间隔1天；
- 用于建立皮下移植瘤模型，评估 FBXW7 对 MMP2 驱动肿瘤生长的抑制作用。
该部分对应结果 3.7 FBXW7 suppresses MMP2-driven gastric tumor growth in vivo（Figure 7）。
四、实验意义
- 理论意义：将 MMP2 的调控从“酶活性调节”拓展到“蛋白生命周期控制”，提出基质蛋白酶稳态的新范式。
- 临床意义：FBXW7-MMP2 轴可作为胃癌独立预后指标；联合检测 FBXW7 甲基化状态与 MMP2 蛋白水平，可能提高术后复发风险分层准确性。
- 治疗意义：传统 MMP 抑制剂缺乏细胞特异性，副作用大；而 FBXW7 介导的内源性 MMP2 降解具有高度特异性。研究提示可开发 PROTACs 增强 FBXW7 活性，或通过表观遗传修饰剂恢复 FBXW7 表达，为胃癌精准治疗提供新策略。
- 局限性：单细胞队列仅3对样本，缺乏空间转录组数据；皮下移植瘤模型不能完全模拟胃癌转移复杂性；FBXW7 对 CAF 中 MMP2 的特异性及上游调控因子仍需进一步研究。
总结：该研究通过多维度实验证明了 FBXW7 通过泛素化介导 MMP2 降解抑制胃癌进展，其中英格恩体内转染试剂用于裸鼠移植瘤模型的质粒递送，是体内验证 FBXW7-MMP2 轴的关键实验手段之一。