首先siRNA由于只 …
阅读更多 »使用AUfOMACS 系统进行辅助细胞的自动分选
材料 小鼠 HBSS 洗涤缓冲液 MACS 缓冲液 CD90 (Thyl. 2) 磁珠 RPMI-10 完全培养基 autoMACS 系统和分选柱 30μm 尼龙网或40μm 预分离滤膜 步骤 用2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞 。 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。 将细胞悬液在4°C,200g 离心10min。 …
阅读更多 »免疫共沉淀:当细胞在 …
阅读更多 »材料 小鼠 HBSS 洗涤缓冲液 MACS 缓冲液 CD90 (Thyl. 2) 磁珠 RPMI-10 完全培养基 autoMACS 系统和分选柱 30μm 尼龙网或40μm 预分离滤膜 步骤 用2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞 。 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。 将细胞悬液在4°C,200g 离心10min。 …
阅读更多 »材料 小鼠 HBSS 洗涤缓冲液 MACS 缓冲液 CD45R(B220) 磁珠 RPMI-10 完全培养基 autoMACS 系统和分选柱 30μm 尼龙网(BD) 或40μm 预分离滤膜 步骤 用2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞。 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。 将细胞悬液在4℃,200g 离心10 min …
阅读更多 »材料 小鼠 HBSS 洗涤缓冲液 MACS 缓冲液 磁珠 RPMI-10 完全培养基 autoMACS 系统和分选柱 30μm 尼龙网或40μm预分离滤膜 步骤 用 5 只小鼠的淋巴结或 2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞 。 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。 将细胞悬液在4℃,200g 离心10 min。弃上清后 …
阅读更多 »材料 RPMI-5 或DMEM-5 完全培养基 新鲜分离的小鼠器官: ≤6 周龄的小鼠胸腺; 6 周至6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结 60mmX15mm 培养皿 剪刀和镊子(保存在70 %乙醇的烧杯中) 装有19G 针头的6ml 注射器 200μm 尼龙滤网 步骤 将新鲜分离的器官放入盛有3ml RPMT-5 或DMEM-5 完全培养基的60mmX15mm培 …
阅读更多 »