[实验原理] 总RNA,经寡聚(d丁)纤维素亲和层析柱分离出mRNA,以寡聚(d丁)为引物,经反转录合成双链cDNA。先用反转录酶合成第一条cDNA链;经碱降解作用除去RNA模板后用大肠杆菌DNA聚合酶,以第一条链cDNA的3’末端结构为引物合成第二链,最后形成双链cDNA。 [仪器、材料与试剂] (一)仪器和材料 紫外线透射仪、移液枪、琼脂糖凝胶电泳系统 …
阅读更多 »CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY | 四川大学口腔医院:一种诱导口腔鳞状细胞癌恶化的信号通路
四川大学口腔医院发表在《CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY》期刊上题为“OSCC cell‑secreted exosomal CMTM6 induced M2‑like macrophages polarization via ERK1/2 signaling pathway”的文章涉及了一种新的体内转染方法 …
阅读更多 »Experimental immunology | 西安交通大学医学院:是什么在助长红斑狼疮?
研究人员在最新的研究中表明:lncRNA MIAT 通过体内降解miR-222来上调 CFHR5 表达,增强狼疮疾病的活动,并在《Experimental immunology》期刊上发表了题为 “LncRNA MIAT enhances systemic lupus erythematosus …
阅读更多 »Nature Communications | 中国药科大学齐炼文教授团队报道:治疗II型糖尿病的新策略
齐炼文教授团队在《Nature Communications》期刊发表了题为“Inactivation of NF-κB2 (p52) restrains hepatic glucagon response via preserving PDE4B induction”的II型糖尿病治疗最新研究成果。该研究采用了RNA体内转染试剂(Entra …
阅读更多 »小RNA 的Northern 杂交分析
该方案描述如何运用Northern 杂交检测15~150 个核昔酸的小RNA (图1) 。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离总RNA, 再采用半干法进行转膜。RNA 通过紫外线照射交联至尼龙膜上,在Church 缓冲液中对RNA 和α-32p标记的寡核昔酸探针进行杂交,并用磷酸成像分析技术(phosphorimager analysis) 进行检测分析。使用包含两个 …
阅读更多 »Stem Cell Research & Therapy | 中国人民解放军总医院:如何改善肾间质纤维,防止肾衰老?
发表在《Stem Cell Research & Therapy 》期刊的“Regulation of connective tissue growth factor expression by miR-133b for thetreatment of renal interstitial fibrosis in aged mice …
阅读更多 »Frontiers in Pharmacology | 首都医科大学报道:治疗对乙酰氨基酚过量造成肝损伤的新策略
该团队在《Frontiers in Pharmacology》期刊上发表了题为“GLT25D2 Is Critical for Inflammatory Immune Response to Promote Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity by Autophagy Pathway”的论文。实验通过RNA …
阅读更多 »Experimental Neurology | circle RNA重庆医科大学钟建军教授团队报道:调控疾病的新方向
钟建军教授团队在《Experimental Neurology》期刊上发表的“Significant changes in circular RNA in the mouse cerebral cortex around an injury site after traumatic brain injury”文章通过携带siRNA的体内转染试 …
阅读更多 »International Immunopharmacology | 中国解放军总医院报道: 治疗肺病的新机制
该团队在《International Immunopharmacology》期刊上发表了题为“LPS-induced vein endothelial cell injury and acute lung injury have Btk and Orai 1 to regulate SOC-mediated calcium influx”的论文 …
阅读更多 »RNAi、miRNA及siRNA的区别和联系
RNA干扰 (RNAi):近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。 MicroRNA(miRNA,微RNA): …
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