2024年 10 月 4日, 星期五
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用AAV进行大脑转染的需要知道的问题

使用腺相关病毒(AAV)进行大脑转染是一种常用的基因传递方法,具有较高的特异性和安全性,但在实际操作中也会面临一些问题。以下是一些常见的问题及其解决方案: 转染效率问题: 选择合适的AAV血清型:不同的AAV血清型对不同类型的神经元和大脑区域具有不同的亲和力。选择合适的血清型可以显著提高转染效率。 病毒滴度:确保使用足够高滴度的AAV病毒,但要避免过高的滴度 …

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体外转录法制备dsRNA中,怎么知道mRNA的靶区域在哪

在体外转录法制备dsRNA(双链RNA)的过程中,确定mRNA的靶区域是关键的一步。以下是一些常用的方法和步骤,以帮助确定mRNA的靶区域: 1. 目标基因的选择 首先,确定你想要抑制或研究的目标基因。你需要有这个基因的完整序列信息(通常从基因数据库中获得,如NCBI)。 2. 设计siRNA或shRNA序列 设计小干扰RNA(siRNA)或小发夹RNA(s …

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亲和层析纯化抗体,请问纯化后收集到的抗体溶液,加甘油或者醇类,糖类的话,浓度一般是加多少

在亲和层析纯化抗体后,通常需要添加稳定剂以保护抗体免受降解。常见的稳定剂包括甘油、糖类(如蔗糖或海藻糖)、以及醇类(如乙醇)。添加这些稳定剂的目的是增加抗体的稳定性,特别是在长期保存或反复冻融过程中。以下是常用稳定剂的添加浓度建议: 1. 甘油 (Glycerol) 甘油常用于抗体溶液的冷冻保存,以防止冰晶形成和蛋白质变性。推荐添加浓度为: 最终浓度:10- …

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慢病毒感染后,细胞不生长怎么办

慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法: 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染,例如在感染前 …

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