英格恩技术博客 专注转染等实验

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相较于MTT法,CCK8试剂盒的优点有哪些?

英格恩生物的CCK8试剂盒具有以下优点: 1.使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂; 2.CCK-8法能快速检测; 3.CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度; 4.CCK-8法的重复性优于MTT 法; 5.CCK-8法对细胞毒性小; 6.CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 7. 性价比高,比同行的 …

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CCK8实验,如何设定空白对照组?

       在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

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CCK8实验,应该每次做标准曲线吗?

       建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样,对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样,灵敏度可能会有轻微的差异,对于不同的批号建议分别做标准曲线。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

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我的western-blot实验经验总结

    我做了很久的WB,最大的一个难点感觉在于样品制备上!蛋白的降解有些时候是你想象不到的,可能出奇的糟糕,也可能完全没事~~如果单独做WB的话,感觉以“快速彻底裂解,先变性后保存”的原则比较有效,尽量选择足够强的裂解液,甚至直接给loading buffer裂解,然后取出部分蛋白定量,其余加入loading buffer100度充分变性,再分装保存。有些 …

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悬浮细胞的siRNA转染实验步骤

悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程   ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为2 …

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细胞周期与细胞凋亡分析

      CCAA试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是基于PI 染色(Propidium staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的试剂盒。 下面以engreen的CCAA试剂盒为例,说明一下检测方法。 1.收集并调整细胞浓度为1×106/ml,取1ml单细胞 …

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western-blot实验要点

1.       样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2.       凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求较高,分离胶的PH值应在8.8左右,而浓缩胶的PH应在6.8左右,最好不要差 …

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能否用384孔板进行CCK8试验?

        可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK8 溶液,如果加入的CCK8体积太少,可以先将CCK8 溶液稀释1 倍,然后加入培养基体积20%的量。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

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CCK8实验中,细胞已经死亡,但是脱氢酶的活性还在,是否能计算细胞数量?

       不能。由于CCK8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量,建议采用别的方法测定。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/ …

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