英格恩技术博客 专注转染等实验
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siRNA转染与DNA转染有什么不一样?

         首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。 其次,siRNA转染比DNA转 染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于 …

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成功siRNA转染的主要关键点有什么?

1.设计合成有效的siRNA RNAi的核心需要 siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要,最优的设计可以用最小的工作浓度取得满意的沉 默效果,减少副反应的发生。siRNA的设计可以通过检索,优先选用经过验证的siRNA或设计多对siRNA。需要强调的是,需要同时设置阴性对照以排 除非特异沉默现象和阳性对照以确认整个实验体 …

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英格恩生物携手南开大学 揭示癌症信号调控机制

Hippo信号通路是一条细胞抑制生长性信号通路,在进化过程中非常保守,多 细胞动物果蝇、小鼠、哺乳动物中都存在Hippo信号通路。最早研究人员在果蝇中发现Hippo信号传导路径是调节细胞大小,器官体积的主要信号通路。之 后研究人员证实Hippo信号通路具有高度保守型,果蝇中Hippo信号通路的成员都能在高等生物中找到对应的同源物。在哺乳动物中,Hippo信号 …

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磷酸钙-DNA共沉淀法的原理和步骤

前些时间有微友在平台上咨询细胞转染的事项,并对一篇博客文章《为什么磷酸钙转染并不稳定?为什么磷酸钙转染并不经济?》比较感兴趣。在这里,对这位微友的疑惑进行更加全方位的了解,在此将磷酸钙转染的原理和步骤和大家分享,以供交流讨论。 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时,可使 DNA 附在细胞表面,这有利于细胞吞入摄取核酸,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进 …

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美国专家公布有关寿命的9个新发现:久坐不动最减寿

责任心强,更长寿。 一项长达8年的研究显示,各种性格特征中,责任心最有助长寿。斯坦福大学研究人员表示,做人谨慎细心、做事耐心有计划,像研究人员那样有点强迫症倾向,都有助长寿。这类人做事自觉,对待婚姻、工作、健康各方面,往往能做出正确的选择,不太会因为抽烟、飙车,不遵医嘱等原因而意外丧生。 饮食定生死。 研究人员发现,地中海饮食是有助长寿的饮食方式,即多吃果蔬 …

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免疫共沉淀经验总结分享

免疫共沉淀:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整的细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间结合的保持下来。 免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“ …

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免疫组化实验结果的判定原则和分析标准

免疫组化实验结果的判定和分析,就实验结果而言,免疫组化技术主要涉及抗体实验结果的描述与分析、图片的确定与选取、相关数据的提供。 免疫组化结果的判定原则: ⒈必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。 ⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上;CK应定位在细胞浆内;PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内;EMA应定位在细胞膜上等等。 …

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研究揭秘人类为何是灵长类中的胖子(灵长类,倭黑猩猩,肌肉)

濒危类人猿倭黑猩猩与黑猩猩一起被称为现存的、与人类最接近的“近亲”。它们每天大部分时间是在枝头攀爬、采集果子和树叶。相形之下,早期人类则常常需要穿越炽热贫瘠的土地,而这种生活方式的不同似乎揭示了人类最终演变成灵长类中多脂肪、少肌肉的物种的原因。 过去30年间,两位研究者对13具圈养倭黑猩猩的尸体进行了分析研究,并比对了之前收集到的49具人类遗体的数据。他们发 …

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新型核酸分子荧光探针——分子信标的原理及应用

分子信标(molecular beacon)是一种具有发夹结构的新型荧光标记核酸探针,具有高灵敏度、高特异型,其在聚合酶链反应(PCR)、核酸序列的分析、活细胞内核酸的动态检测、蛋白质(酶)与核酸的相互作用等方面具有广泛的应用。 分子信标的结构 分子信标的结构一般包括三个部分:环状区、信标茎干区、荧光基团和猝灭基团。荧光基团一般联接在信标分子的5 端;猝灭基 …

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