该团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了题为“MiR-128-3p Alleviates Spinal Cord Ischemia/Reperfusion Injury Associated Neuroinflammation and Cellular Apoptosis via SP1 Suppression …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与冠状动脉微栓塞问题研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心肌损伤中的作用研究
冠状动脉微栓塞(CME)是急性心肌梗死(AMI)急诊经皮冠状动脉介入治疗的常见并发症,发生率为15%~20%。它可以直接导致“无血流”或“血流缓慢”。它是AMI患者长期预后不良和主要心脏不良事件的独立预测因子。研究表明,CME引起的局部心肌炎症是导致进行性心功能不全的主要原因。现分享一篇体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心 …
阅读更多 »western-blot化学发光(ECL)出现高背景的原因是什么?
做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清楚“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有:1.含HRP的抗体;2.发光试剂;3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜。这里面,在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体的因素造成的,抗体浓度过高,洗涤不充分,封闭 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与PPARα调节肿瘤细胞的增殖和衰老研究
肉碱棕榈酰转移酶(Carnitine palmitoyltransferase 1c,cpt1c),位于线粒体膜外,在脂肪酸的转运和氧化中起着关键的作用。它也参与细胞增殖,是癌细胞衰老的潜在驱动力。然而,其上游调控机制是未知的。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARαα)是一个配体激活转录因子,可调节脂质代谢和肿瘤进展。现分享一篇ECL发光液(enlight) …
阅读更多 »体内转染(entranster)与NEMO结合域肽减轻实验性脑出血后血肿周围炎症损伤研究
炎症加重了脑出血(ICH)的致命后果。近年来,许多研究发现,核因子-κB(NF-κB)是一种重要的转录因子,可引起ICH血液周围区域的炎症。NF-κB必需调节剂(nemo)-结合域(nbd)肽,一种跨越ikkα或ikkβ的nbd的细胞渗透性肽,作为NF-κB的高特异性抑制剂发挥作用。这种肽能负调节NF-κB通路。现分享一篇体内转染(entranster)与N …
阅读更多 »慢病毒载体
慢病毒属于反转录病毒科,与该科其他病毒一样,病毒粒子携带ssRNA, 必须反转录并整合至宿主细胞基因组(原病毒)产生有效感染。慢病毒的显著特点是其基因组复杂、圆柱形或圆锥形的核衣壳携带病毒基因组。核衣壳被携带包膜糖蛋白的双层膜包裹,包膜糖蛋白负责与细胞表面受体进行相互作用及进入宿主细胞。反转录病毒是几乎所有脊椎动物的主要病原体。人类免疫缺陷病毒l 型(HIV …
阅读更多 »动物实验系列篇章之二——实验动物的编号和分组
一、编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。 (一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。 (二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打 …
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