RNA转染效率低,可能的原因: 1. 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster。 2. 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 3.检测时间有问题。适当调整检测时间。 4. RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 5. 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA(siRNA)是通过RNA干扰(RNAi)在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具,由于RNAi利用天然途径,即在蛋白质翻译发生之前,在转录后水平上关闭基因表达,因此,siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送 …
阅读更多 »AAV 载体
腺相关病毒(AAV) 是第一个也是唯一的改造用于基因递送的ssDNA 病毒,无包膜,直径20~26nm 的二十面体核衣壳包裹着一条4.7kb 线性ssDNA 基因组。腺相关病毒是已知最小的哺乳动物病毒,因最早发现为腺病毒样本中的一个病毒污染成分而得名。没有辅助病毒,如腺病毒共感染时,它的天然复制能力缺失,与任何人类疾病不相关(Daya and Berns 2 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞(MDSC)介导了广泛而深刻的免疫抑制,特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中,MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达;在人类中,MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »体内转染与晚期氧化蛋白产物诱导肠上皮细胞G1期停滞研究
克罗恩病(CD)是一种胃肠道复发性炎症性疾病。在CD的整个发病过程中,肠上皮细胞(IEC)仍然是各种促炎因子的主要靶点。据报道,IEC功能障碍导致肠道通透性增加,共生细菌过度转移到固有层,从而导致慢性粘膜炎症。肠上皮细胞周期阻滞和细胞死亡是肠粘膜炎症的标志,也是CD发病机制中的起始和加重因素。然而,对上皮细胞周期停滞的调节仍知之甚少。现分享一篇 …
阅读更多 »病毒包装过程中,细胞大量死亡,还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中,如果观察到细胞大量死亡,是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素: 病毒滴度:尽管细胞大量死亡,仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高,可以继续收集病毒用于后续实验。 污染:细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染,收集病毒可能不是一个好主意,因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »都说RNAi很容易降解,转染效率很低,是真的吗?
RNAi就是利用降解双链RNA的酶系统,人工引入一段和目标RNA互补的序列,这样,在细胞内形成双链RNA,诱发降解机制,使目标RNA降解,无法被进一步翻译。 在转染过程中,有人就在担心,dsRNA的稳定性是相对于单链RNA而言的!RNA怎么办? RNAi中,标准的非修饰的siRNA确实容易降解,这不仅在保存过程中,而且在转染过程中。对siRNA的降解,可以合 …
阅读更多 »体内转染siRNA在病毒性心肌炎小鼠模型中的抗病毒研究
Coxsackie Virus属于小RNA 病毒科,肠道病毒(enteroviruses)属,是导致病毒性心肌炎的主要病毒之一,多发于儿童和青少年,可引起急性心力衰竭,部分可发展为扩张性心肌病,严重危害少年儿童健康,目前临床缺乏特异有效的药物。RNA 干扰自1998 年《Science》杂志报道以来,已被广泛 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA SNHG12对胃癌细胞BGC-823增殖的影响研究
胃癌是一种常见的上皮性癌,是世界范围内最常见的第五种恶性肿瘤。近年来胃癌的发病率一直呈上升趋势。每年约有一百万例胃癌发生,其中东亚地区占到50%,尤其是中国,严重危害人民健康和生命。中国胃癌的年发病率约为400000,占全世界病例总数的42%,并且总死亡率逐年上升。因此,寻找可靠的胃癌标志物和靶点是至关重要的 …
阅读更多 »动物体内转染试剂可以进行哪些研究?
动物体内转染试剂entranser-in vivo专用于动物体内转染,可直接转染DNA或者RNA到动物体内进行: ● 基因治疗的动物体内研究 ● RNA干扰的动物体内研究 ● 蛋白功能的动物体内研究
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