2024年 4月 26日, 星期五
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细胞RNA转染实验注意事项

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …

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质粒DNA转染注意事项

1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …

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siRNA转染实验需要知道的关键点

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …

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RNA转染(Entranster)与三氯乙烯和肝癌发生的研究

       三氯乙烯(TCE)是一种挥发性有机化学试剂,已广泛应用于工业有机溶剂中,是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一,TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道,TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中,TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌(HCC),但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster) …

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慢病毒适用于哪些细胞?

慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点: ● 感染范围广   …

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siRNA转染效率低的原因有哪些?

1. RNA与转染试剂比例不佳    由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳    调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …

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siRNA转染(engreen)与树突状细胞的表观遗传修饰研究

      根据不同的环境,树突状细胞(DC)可能变现为活跃或耐受性,但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染(Entranster-R4000)与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献,显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs(DC)分化为活性或耐受DC。

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英格恩生物和您一起探究靶向LunX抑制肺癌的生长及转移

肺癌是当今世界各国常见的恶性肿瘤,并已成为绝大多数国家癌症死亡的主要原因。最新统计表明每年有超过一万名的患者因肺癌死亡,其中以非小细胞肺癌(NSCLC)最常见,大部分NSCLC患者在就诊时已经出现远处转移病灶。在很长的一段时间里,对晚期或转移性非小细胞肺癌患者除了进行最佳支持治疗外,就只能进行“含铂类药物的化疗”的治疗方法,与最佳支持治疗相比,虽然一定程度上 …

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ECL发光液(enlight)与鼻腔倒乳头状瘤恶变为鳞状细胞癌研究

      鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤,每年全球发病率约为1/10万。组织学上,鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌,包括鳞状细胞癌(SCC)、腺癌和腺样囊性癌,倒置乳头状瘤(IP)是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%,但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此,探索ips …

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