PRDX3是调节细胞氧化还原状态的线粒体过氧化物还原酶。据报道,PRDX3在肝癌中过度表达,但PRDX3在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用尚未得到很好的阐述。现分享一篇ECL发光液(enlight)与沉默PRDX3抑制肝癌细胞生长及促进细胞侵袭和细胞外基质降解研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与睾丸生殖细胞肿瘤研究
睾丸生殖细胞瘤(Testic..cell tumors,TGCTs)是青少年和青年男性最常见的实体瘤之一,约占2012年全世界20~39岁男性肿瘤的8.9%。肿瘤生长受癌细胞与肿瘤微环境的串扰调制。最近的进展表明,肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境以间接决定其进展。然而,这一过程在睾丸生殖细胞肿瘤(TGCTs)中知之甚少。现分享一篇RNA转染( …
阅读更多 »siRNA转染后细胞出现死亡是什么原因?
siRNA转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂,如Entranster试剂,另外,如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的,出现细胞死亡 …
阅读更多 »客户问:你好,如果电转以后抗性板子上一个没长,无抗的都长满了,这种情况是没电进去,需要增加次数吗,还是其他原因呢?
回答:“无抗的都长满”,说明细胞活性和数量没问题,基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点:质粒浓度是否足够(建议>100ng/μL)、抗性基因是否匹配(如氨苄不能用于表达AmpR的质粒)、抗性板浓度是否正确(过高会杀死阳性克隆)。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒,但残留的盐 …
阅读更多 »如何选择慢病毒和腺病毒系统?
慢病毒载体系统和腺病毒载体系统比较 病毒表达系统 慢病毒表达系统(Lentivirus) 腺病毒表达系统(Adenovirus) 病毒基因组 RNA病毒 双链DNA病毒 复制 自主复制 自主复制 是否整合 病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因 病毒基因组游离于宿主基因组外,瞬时表达外源基因 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细胞,适用于难转染的原 …
阅读更多 »体内转染(英格恩)与非小细胞肺癌放射敏感性研究
由于环境污染和烟草的持续消费,肺癌已成为男性和女性癌症死亡的最常见原因。肺癌分为两类:小细胞肺癌和非小细胞肺癌。在所有肺癌患者中,非小细胞肺癌占80%-85%。放疗技术已成为70%非小细胞肺癌患者缓解疼痛和梗阻性症状等亚临床疾病的主要治疗方法。与小细胞肺癌相比,非小细胞肺癌对放射治疗的抵抗力更强,逆转这种抵抗力是临床医师目前面临的挑战之一。 现分享 …
阅读更多 »体内转染与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是创伤性死亡和致残的主要原因之一,新的研究表明内质网应激在TBI的病理生理过程中起着重要作用。牛磺脱氧胆酸(TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,已被报道为ER应激抑制剂和化学伴侣,并具有抑制细胞凋亡和炎症的潜力。 现分享一篇体内转染(Entranster)与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活减轻早期脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »超敏型ECL发光液-Enlight-plus
产品介绍 用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。 超300家实验室应用3年,从未想过更换! 主要特点 Pg级别 EnlightTM-Plus含高灵敏的发光增强剂,检测级别可以达到pg级。 低背景 EnlightTM-Plus采用精准的发光底物,有效降低发光试剂造成的非特异发光和背景发光。 时间长 EnlightTM-Plus采用特异的发 …
阅读更多 »CCK8实验中,一个孔中应接种多少个细胞?
当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔(100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24 孔板或6 孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK8 溶液。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击h …
阅读更多 »siRNA转染很有效(蛋白水平明显降低),将siRNA序列构建进慢病毒(shRNA形式)后感染细胞,荧光表达很强,但目标蛋白并未敲低,这是什么原因
你遇到的这个问题在慢病毒(lentivirus)介导的RNA干扰实验中其实挺常见,下面我们逐步分析下可能的原因: 实验现象简述: siRNA转染敲得很有效(蛋白水平明显降低); **将siRNA序列构建进慢病毒(shRNA形式)**后感染细胞; 荧光表达很强(说明病毒成功进入细胞,且有表达); 但目标蛋白并未敲低,几乎没有 knockdown 效果。 可能原 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享