英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒，，可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与兔动脉粥样硬化模型血管内皮细胞功能障碍研究
血管内皮功能障碍（VED）是动脉粥样硬化发生和发展的重要因素。以往的研究表明，饮食诱导的动脉粥样硬化会导致内皮细胞通透性增加。然而，确切的基础机制仍知之甚少。现分享一篇ECL发光液（enlight）与兔动脉粥样硬化模型血管内皮细胞功能障碍研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（entranster）与间充质干细胞减轻蛛网膜下腔出血早期脑损伤研究
活化的小胶质细胞介导的神经炎症被认为是蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）发病机制中的一个潜在关键因素。骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植的治疗潜力已在多个脑损伤模型中得到证实，并被认为涉及炎症反应的调节。现分享一篇体内转染（entranster）与间充质干细胞减轻蛛网膜下腔出血早期脑损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何选择慢病毒和腺病毒系统？
慢病毒载体系统和腺病毒载体系统比较 病毒表达系统 慢病毒表达系统（Lentivirus） 腺病毒表达系统（Adenovirus） 病毒基因组 RNA病毒 双链DNA病毒 复制 自主复制 自主复制 是否整合 病毒基因组整合于宿主基因组，长时间、稳定表达外源基因 病毒基因组游离于宿主基因组外，瞬时表达外源基因 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细胞，适用于难转染的原 …
阅读更多 »动物体内转染后，遗传性转能维持多久？
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染，对目标基因的改变，一般注射1次，可以维持7天左右。随后，随着转入的核酸的代谢，效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态，这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态，可以多次注射。
阅读更多 »体内外RNA转染（Entranster）与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注（I/R）可引起急性肾损伤，其特征是增加活性氧（ROS）和线粒体损伤，并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3（SIRT3）可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动态变化。但关于SIRT3是否能够及如何减轻I/R引起的急性肾 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与氧化应激诱导细胞坏死研究
细胞坏死是一种缺乏细胞凋亡和自噬特征的细胞死亡。在过去的几年中，人们发现坏死的发生和过程是程序性的和严格调节的。现分享一篇ECL发光液（enlight）与氧化应激诱导细胞坏死研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点？
一、原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »siRNA细胞转染实验效率低的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
阅读更多 »心肌梗死中Siat7A促进细胞凋亡研究
标题 Sialyltransferase7A, a KIf4-responsive gene, promotes cardiomyocyte apoptosis during myocardial infarction 影响因子 该研究发表在期刊《Basic Research in Cardiology》上，2015年的影响因子为5.281。最新影响因子为8 …
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