首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。 其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与去分化软骨瘤进展研究
去分化软骨肉瘤(DDCs)是一种特殊类型的肉瘤,约占传统软骨肉瘤(CCS)的10%~15%。DDCs是一种由两种不同成分组成的肿瘤,一种与低级别CCS相邻的恶性肿瘤,两部分之间有清晰的边界。由于早期转移而对化疗缺乏反应,DDCS预后差,5年生存率仅为10%~24%。因此,迫切需要探索CCS发展成为DDCS并找到新的治疗方法。现分享一篇体内转染(Entrans …
阅读更多 »Cell Death & Disease | 西北农林科技大学报道:如何有效增肌?
该团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表了题为“CircRILPL1 promotes muscle proliferation and differentiation via binding miR-145 to activate IGF1R/PI3K/AKT pathway”的论文。研究人员利用体内转染试剂(En …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究
羟基氯喹(Hydroxychloroquine,HCQ),氯喹的羟基化类似物,是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂,它抑制溶酶体酸化引起的自噬,并随后阻断自噬体与溶酶体的融合,从而导致自噬体的积累,从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液(enlight)与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中线粒体依赖性凋亡研究
据报道,早期脑损伤(EBI)是蛛网膜下腔出血(SAH)患者高死亡率和不良预后的主要原因,细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近,有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白(txnip)将内质网应激(ER应激)与神经元凋亡联系起来,并加重EBI。然而,其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液(enlight)与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »体内转染与TAR DNA结合蛋白功能丧失和继发性脑损伤研究
TAR DNA结合蛋白-43(TDP-43)是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白,参与RNA转录、选择性剪接,并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症(ALS)和额颞叶变性(FTLD)患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明,TDP-43蛋白是一种 …
阅读更多 »客户问:你好,如果电转以后抗性板子上一个没长,无抗的都长满了,这种情况是没电进去,需要增加次数吗,还是其他原因呢?
回答:“无抗的都长满”,说明细胞活性和数量没问题,基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点:质粒浓度是否足够(建议>100ng/μL)、抗性基因是否匹配(如氨苄不能用于表达AmpR的质粒)、抗性板浓度是否正确(过高会杀死阳性克隆)。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒,但残留的盐 …
阅读更多 »RNA转染实验效率低的原因
RNA转染效率低,可能的原因: 1. 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster。 2. 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 3.检测时间有问题。适当调整检测时间。 4. RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 5. 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »TUG1通过促进HuR泛素化抑制脑缺血再灌注后血管生成
1.标题: LncRNA TUG1 Repressed Angiogenesis by Promoting the Ubiquitination of HuR and Inhibiting Its Nuclear Translocation in Cerebral Ischemic Reperfusion Injury长链非编码RNA TUG1通过促进HuR …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与猪繁殖与呼吸综合征病毒与胆固醇-25-羟化酶研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种免疫调节性病原体,已被公认为调节宿主干扰素(IFN)系统。胆固醇-25-羟化酶(CH25H)是一种重要的干扰素刺激基因(ISG)编码多面体膜蛋白,显著抑制许多病毒的复制。最新研究表明,CH25H抑制PRRSV的复制,同时PRRSV的感染可显著下调CH25H的表达,但涉及CH25H下调的病毒蛋白尚不清楚。现分享一篇EC …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享