英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1. siRNA与转染试剂比例不佳 由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细 …
阅读更多 »慢病毒感染后，细胞不生长怎么办
慢病毒感染后，细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法： 病毒滴度过高： 原因：高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性，使细胞无法正常生长。 解决方法：降低病毒的滴度，进行一系列稀释实验，找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 细胞状态不佳： 原因：感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法：确保细胞在最佳状态下进行感染，例如在感染前 …
阅读更多 »TGF-β1诱导miR-133a抑制肺纤维化
标题: Transforming growth factor (TGF)-β1-induced miR-133a inhibits myofibroblast differentiation and pulmonary fibrosis 期刊: Cell Death and Disease 影响因子: 5.959 研究背景 特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性 …
阅读更多 »肠Nogo-B抑制GLP1机制研究
研究背景 GLP1（胰高血糖素样肽-1）在肠内分泌细胞（EECs）中由胰高血糖素原（proglucagon）经PCSK1切割生成，通过刺激胰岛素分泌和抑制胰高血糖素分泌调节血糖。 Nogo-B（Reticulon 4B）是一种内质网（ER）驻留蛋白，在代谢疾病中起重要作用，但其在GLP1生成中的功能尚不清楚。 主要发现 Nogo-B与proglucagon结 …
阅读更多 »siRNA转染很有效（蛋白水平明显降低），将siRNA序列构建进慢病毒（shRNA形式）后感染细胞，荧光表达很强，但目标蛋白并未敲低，这是什么原因
你遇到的这个问题在慢病毒（lentivirus）介导的RNA干扰实验中其实挺常见，下面我们逐步分析下可能的原因： 实验现象简述： siRNA转染敲得很有效（蛋白水平明显降低）； **将siRNA序列构建进慢病毒（shRNA形式）**后感染细胞； 荧光表达很强（说明病毒成功进入细胞，且有表达）； 但目标蛋白并未敲低，几乎没有 knockdown 效果。 可能原 …
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点？
一、原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »转基因动物的那些事儿，想说你为什么这么难？
1980年底Gordon等人首次将克隆的基因注入小鼠受精卵原核，然后移植于假孕的母鼠输卵管,培育出第1个转基因动物。这种将外源性基因用实验方法插入动物生殖细胞的基因组而获得具有插入基因特性，并能正常繁衍的动物称为转基因动物 ( transgenicanimals)。转基因技术是生物学领域最新重大进展之一，已能渗透到生物学、医学、畜牧学等学科的广泛领域。转基因 …
阅读更多 »英格恩DNA体内转染产品相关文献
采用DNA体内转染试剂EntransterTM– in vivo发表的文献，研究方向包括大脑、支气管、肺部、肝脏、胰腺、肠、骨、肌肉、免疫系统等方面。欢迎大家阅览与交流。 序号 研究方向 实验材料 文章题目 期刊 大脑 点击此处，打包下载所有大脑相关文献，提取码：v6at 1 脑损伤 DNA Rbfox-1 contributes to CaMK …
阅读更多 »RNA转染效果图（Entranster）
体内转染（engreen）与骨关节炎软骨细胞凋亡研究
骨性关节炎（OA）是一种退行性关节疾病，其特征是软骨破坏、关节边缘骨赘形成（骨赘）、软骨下骨硬化、关节囊改变，以及滑膜的炎症等。OA是关节炎最常见的形式，是老年人疼痛和残疾的主要原因，OA对女性的影响比男性大。OA患者最常见的症状是关节疼痛和僵硬，其他症状可能包括关节肿胀、四肢无力和麻木及运动范围减小等。现 …
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