英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
RAS级联的异常激活在人类肝细胞癌（HCC）中普遍存在，与ras的罕见突变无关。然而，在肝癌发生过程中，ras级联与肝脂肪变性的关系仍在研究中。现分享一篇ECL发光液（enlight）与饮食诱导的肝脂肪变性通过CPT1α激活ras促进肝癌发生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中线粒体依赖性凋亡研究
据报道，早期脑损伤（EBI）是蛛网膜下腔出血（SAH）患者高死亡率和不良预后的主要原因，细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近，有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白（txnip）将内质网应激（ER应激）与神经元凋亡联系起来，并加重EBI。然而，其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液（enlight）与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »在共转染中，怎么看质粒的表达能力？通过什么方式呢？
共转染实验中，判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式，具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式： 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因（如GFP、RFP等），通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。这种方法不仅可以评估质粒的转染效率，还可以间接反映出质粒的表达能力。 优势：快速、简便，能够同时评估转染效率和蛋白表达。 …
阅读更多 »客户：做293T细胞转染，遇到了单转质粒过表达没有共转质粒过表达高是怎么回事？
回答： 1. 启动子竞争与转录因子的“稀释” 如果你在共转染中加入的是一个非表达质粒（载体骨架）或特定的辅助质粒，目标表达量反而增高，可能是因为单转染时目标质粒浓度过高，导致细胞内的转录因子被“过度征用”或者触发了细胞的应激机制。 适当的质粒比例：有时候少量的质粒反而能获得更稳定的转录效率，避免了转录机器的饱和。 2. 辅因子或辅助蛋白的协同作用（核心原因） …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与缺氧诱导因子和肾再生研究
虽然哺乳动物的肾再生发生在在整个生命期中，但哺乳动物的成熟的肾脏并不能充分再生，尤其是肾小球。以往的研究表明，肾部分切除术后的脱细胞肾支架可增强肾的再生。现分享一篇体内转染（Entranster）与缺氧诱导因子和肾再生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »直接克隆法构建重组腺病毒基因组
pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒，，可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …
阅读更多 »TUG1通过促进HuR泛素化抑制脑缺血再灌注后血管生成
1.标题： LncRNA TUG1 Repressed Angiogenesis by Promoting the Ubiquitination of HuR and Inhibiting Its Nuclear Translocation in Cerebral Ischemic Reperfusion Injury长链非编码RNA TUG1通过促进HuR …
阅读更多 »在CCK8显色过程中，如何终止反应？
有以下几种方法（96 孔板）： ①在显色反应后，将培养板放置4℃冰箱内。②每孔加10μl 0.1 M HCL 溶液。③每孔加10μl 的 1%（w/v）的SDS（十二烷基硫酸钠）溶液。注意：反应停止后，应在24 小时之内测定。 如需了解更多关于CCK8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点？
一、原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与NEMO结合域肽减轻实验性脑出血后血肿周围炎症损伤研究
炎症加重了脑出血（ICH）的致命后果。近年来，许多研究发现，核因子-κB（NF-κB）是一种重要的转录因子，可引起ICH血液周围区域的炎症。NF-κB必需调节剂（nemo）-结合域（nbd）肽，一种跨越ikkα或ikkβ的nbd的细胞渗透性肽，作为NF-κB的高特异性抑制剂发挥作用。这种肽能负调节NF-κB通路。现分享一篇体内转染（entranster）与N …
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