为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想怎么办?
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »英格恩动物转染试剂在商业水产品中的研究贡献
1.(IF9.438)文献名称:ceRNA crosstalk mediated by ncRNAs is a novel regulatory mechanism in fish sex determination and differentiation 实验动物:商品鱼 研究内容: 该研究揭示了非编码RNA(ncRNA)通过ceRNA机制调控鱼类性别决定 …
阅读更多 »如何评估体内转染实验的效率?
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射方法会明显影响效果。比如,大脑神经细胞的体内转染,可以采用尾静脉注射和侧脑室注射,用侧脑室的方法就好得多。再比如,肺部的体内转染,用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与靶器官的接触越直接越充分,效果越好。干扰效率可以理解为干扰的细胞数量和全部细胞的 …
阅读更多 »Oxidative Medicine and Cellular Longevity | 天津医科大学余剑波教授团队报道:保护肺损伤的新见解
余剑波教授团队在《Oxidative Medicine and Cellular Longevity》期刊发表了题为“Hydromorphone Protects against CO2 Pneumoperitoneum-Induced Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondri …
阅读更多 »ECL发光液与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征,即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病(AD)进展,是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子(CNTF)不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活,还可显著降低淀粉样蛋白β(Aβ)聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液(enlight)与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中,微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类,并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为例,这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的,但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议,这实际上是由于对DON毒性的准确和广泛接受的 …
阅读更多 »慢病毒感染与PD-1和嵌合抗原受体修饰的T细胞抗肿瘤功能研究
嵌合抗原受体修饰的T(CAR-T)细胞对血液恶性肿瘤具有很强的抗肿瘤活性。然而,将这一成功转化为实体瘤仍然令人沮丧。在实体瘤的治疗中,CAR-T治疗面临着免疫抑制环境等巨大困难。在抑制环境的建立中,程序性死亡因子-1(pd-1)/程序性死亡因子配体1(pd-l1)轴被认为起关键作用。现分享一篇慢病毒感染(envirus)与PD-1和嵌合抗原受体 …
阅读更多 »血液中髓源性单核细胞抑制肿瘤的研究
标题: MicroRNA 449c Mediates the Generation of Monocytic Myeloid-Derived Suppressor Cells by Targeting STAT6 期刊: Molecules and Cells 影响因子: 6.5 使用英格恩产品 (Entranster™-in vivo) 的 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与内皮素-1与肺动脉平滑肌细胞研究
肝肺综合征(HPS)是肝病晚期的严重并发症,其死亡率明显增加。循环介质介导的肺血管重构(PVR)在HPS发病机制中起重要作用,但其机制尚不明确。现分享一篇RNA转染(Entranster)与内皮素-1(ET-1)与肺动脉平滑肌细胞研究的文献,以供参考。
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