2024年 5月 21日, 星期二
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英格恩技术资料

DNA转染效率低的可能的原因有哪些?

1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …

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体内转染与mir-301a抑制和脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用研究

      脑缺血病具有发病率高、致残率高、死亡率高等特点,其主要治疗原则是恢复缺血区的血液再灌注。但一旦发生脑缺血,血液再灌注短期恢复后神经损伤会进一步加重,称为脑缺血再灌注(I/R)损伤。总的来说,脑I/R损伤的病理生理机制非常复杂,在I/R损伤过程中涉及到各种元素,如氧化应激、凋亡和炎症反应。更重要的是,炎症反应和细胞凋亡被认为是诱发脑I/R损伤的主要 …

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体内转染与miR-155表达上调和脓毒症患者免疫抑制研究

       脓毒症是一种主要是由于感染而导致的全身炎症反应,可导致多器官功能障碍综合征,死亡率高。虽然在过去十年中脓毒症的预防和控制取得了进展,但脓毒症仍然是ICU(ICU)患者死亡的主要原因,早期诊断和评估是脓毒症患者预后的关键。因此,开发一种生物标志物用于早期诊断和准确的预后评估是必要的。先分享一篇体内转染(Entranster)与miR-155表达上 …

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ECL发光液(enlight)与鼻腔倒乳头状瘤恶变为鳞状细胞癌研究

      鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤,每年全球发病率约为1/10万。组织学上,鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌,包括鳞状细胞癌(SCC)、腺癌和腺样囊性癌,倒置乳头状瘤(IP)是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%,但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此,探索ips …

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ECL发光液与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究

       通过其病理特征,即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病(AD)进展,是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子(CNTF)不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活,还可显著降低淀粉样蛋白β(Aβ)聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液(enlight)与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献, …

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DNA转染与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究

动脉粥样硬化(AS)是各种心脑血管疾病的主要病因,发病率和死亡率都很高。氧化应激诱导内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化的病理基础。此外,鞘磷脂和Wnt/β-连环素信号通路被认为与AS密切相关,但具体机制尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究的文献,以供参考。

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如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等(非小鼠)动物的体内基因敲除/表达?

如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢? 如果实验室研究人体疾病基因,需要稳定表达时,我们可能会选择基因工程小鼠,但如果课题组研究的是其他哺乳动物,比如猪、蝗虫、鱼之类的,基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体,然后打入靶细胞进行同源重组,再培养细胞、筛选……一套工夫下来,要不目的基因没重组,要不模型全死了。要不找公司做?老牌的公司构建基因工 …

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如何优化RNA转染条件?

可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …

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体内转染(Entranster)研究囊型包虫病相关蛋白

        囊型包虫病(包虫病),是由细粒棘球绦虫引起的一种被忽视的热带疾病,可造成数百万人发病及死亡,同时给全球的畜牧业带来巨大的经济损失。寄生虫中tetraspanin家族蛋白已成为与宿主寄生病状态相互作用的重要分子,也有利于疫苗和诊断试剂的发展。现分享一篇利用体内转染方法(Entranster-in vivo)研究囊型包虫病相关蛋白的文献,此方法新 …

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提高RNA转染效率的几点建议

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …

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