首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染来 …
阅读更多 »如何利用好腺病毒感染的原理和特点?
一、原理 腺病毒(Adenovirus,Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型,大多数Ad载体都是基于血清型2和5,通过转基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制,因此是一种适用于治疗的高效控制系统。 二、特点 1) 几乎可以感染所有类型的细胞 2) …
阅读更多 »慢病毒倍比稀释测定活性的实验中,DAY2天时,把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时,用把细胞原培养基吸取出去吗,还是直接把病毒液添加进去?
好问题!在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度(titer) 的时候,DAY2 加入病毒时是否更换培养基,确实是一个关键点,对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式,以及推荐做法: 推荐操作:先吸掉培养基,再加病毒(常规做法) 流程简述(以DAY2为节点): DAY1:铺板细胞(如293T、HEK293,常用于测滴度); DAY2:感染操作 吸掉旧培养基; …
阅读更多 »电转染试剂对比
由此可见,在转染各类细胞系时,Entranster-E具有明显的优势,是一款比较理想的电转染试剂。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与TRPM7和肾脏保护作用研究
瞬时受体电位M型7(TRPM7)是一种膜离子通道和激酶。TRPM7在肾脏丰富表达,缺血再灌注损伤(IR)可上调TRPM7的表达。我们以前的研究表明,环螺旋B肽(CHBP)改善肾IR相关的损伤,但其作用机制尚不明确。现分享一篇体内转染(Entranster)与TRPM7和肾脏保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »siRNA转染至细胞有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121(ZNF121)已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联,以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用,现分享一篇DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCM …
阅读更多 »体内转染与miR-155表达上调和脓毒症患者免疫抑制研究
脓毒症是一种主要是由于感染而导致的全身炎症反应,可导致多器官功能障碍综合征,死亡率高。虽然在过去十年中脓毒症的预防和控制取得了进展,但脓毒症仍然是ICU(ICU)患者死亡的主要原因,早期诊断和评估是脓毒症患者预后的关键。因此,开发一种生物标志物用于早期诊断和准确的预后评估是必要的。现分享一篇体内转染(Ent …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与LncRNA拯救肝损伤并促进肝细胞增殖研究
肝损害对人类健康产生不利影响,在世界范围内发病率很高。它可由多种有毒物质引起的,例如酒精和活性氧。持续性肝损伤可导致大范围肝细胞损害,伴随严重纤维化和不可逆性肝硬化,常导致死亡。影响肝损害的很多因素现在仍不清楚,这阻碍了治疗。因此,更好地了解肝损伤的相关因素对于治疗相关的肝脏疾病至关重要。现分享一篇ECL发 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享