在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔主要有以下几个作用: 提高实验数据的可靠性由于生物实验存在一定的随机误差,复孔可以减少实验数据的偶然性,提高测量的准确性和重复性。 计算平均值,减少误差即使计算滴度时可能未直接用到每个复孔的数据,而是取某个稀释度下的阳性孔(如GFP阳性细胞数或抗生素筛选存活细胞数),但通常会计算复孔的平均值,以降低误差。 观察实验一 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA(siRNA)是通过RNA干扰(RNAi)在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具,由于RNAi利用天然途径,即在蛋白质翻译发生之前,在转录后水平上关闭基因表达,因此,siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送和药代动力学性质。现分享一篇体内转染(Entran …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与氧化应激诱导细胞坏死研究
细胞坏死是一种缺乏细胞凋亡和自噬特征的细胞死亡。在过去的几年中,人们发现坏死的发生和过程是程序性的和严格调节的。现分享一篇ECL发光液(enlight)与氧化应激诱导细胞坏死研究的文献,以供参考。
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与SASH1和黑色素细胞研究
在小鼠胚胎中,成黑素细胞起源于背神经脊,沿着表皮和真皮之间的背侧通路迁徙,在真皮中分散,最终进入表皮,并广泛扩散。现分享一篇RNA转染(Entranster)与SASH1和黑色素细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »病毒感染增强剂Envirus使用时出现细胞毒性怎么办?
出现细胞毒性的原因有: 1.增强剂用量过大。建议适当减少增强剂用量。 2.病毒量过大。适当减少病毒用量。 3.适当减少病毒用量。增加培养基量或更换培养基。
阅读更多 »体内转染(entranster)与大鼠脑外伤后大脑皮层环状RNA变化研究
创伤性脑损伤(TBI)可分为初始损伤和继发损伤两个阶段。继发性损伤可使初始损伤恶化,导致炎症反应增强和细胞死亡增加,导致神经功能缺陷。初始损伤不能改变,但通过有效的治疗可以减轻继发损伤。虽然在过去几十年里已经做出了许多努力,但脑外伤仍然是一种严重的疾病,死亡率和发病率都很高,而且现有的治疗策略也很有限,这给社会和家庭带来了严重的经济负担。脑损伤的复杂生物学机 …
阅读更多 »DNA转染试剂对比
由此可见,Entranster-H4000具有更好的转染效果。
阅读更多 »Journal of Cellular Physiology | 西北工业大学生命科学院报道:治疗骨质疏松症新机制
该团队在《Journal of Cellular Physiology 》期刊上发表了题为“A novel long noncoding RNA AK016739 inhibits osteoblast differentiation and bone formation”论文。文章通过RNA体内转染(EntransterTM-in vivo, …
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