1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »Frontiers in Pharmacology | 首都医科大学报道:治疗对乙酰氨基酚过量造成肝损伤的新策略
该团队在《Frontiers in Pharmacology》期刊上发表了题为“GLT25D2 Is Critical for Inflammatory Immune Response to Promote Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity by Autophagy Pathway”的论文。实验通过RNA …
阅读更多 »调节性T细胞编程促进神经再生
标题 Programming of Regulatory T Cells In Situ for Nerve Regeneration and Long-Term Patency of Vascular Grafts (通过原位编程调节性T细胞促进神经再生与血管移植物的长期通畅性) 影响因子 该研究发表于 Research 期刊,2022年影响因子约为 11 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »Cell Death & Disease | 西北农林科技大学报道:如何有效增肌?
该团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表了题为“CircRILPL1 promotes muscle proliferation and differentiation via binding miR-145 to activate IGF1R/PI3K/AKT pathway”的论文。研究人员利用体内转染试剂(En …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)。突触体相关蛋白23(SNAP23)和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体(NMDA受体)运输,这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性,SNAP23被证明可与膜联蛋白A7(ANXA7)相互作用。现分享一篇体内转染(Entr …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与SASH1和黑色素细胞研究
在小鼠胚胎中,成黑素细胞起源于背神经脊,沿着表皮和真皮之间的背侧通路迁徙,在真皮中分散,最终进入表皮,并广泛扩散。现分享一篇RNA转染(Entranster)与SASH1和黑色素细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »NMDA受体调控神经再生研究
文献标题 NMDA Receptors Coordinate Metabolic Reprogramming and Mitophagy in Schwann Cells to Promote Peripheral Nerve Regeneration 影响因子 该文献发表于《Research》期刊,影响因子为 10.7(根据文件名提示)。 概要 本研究揭示 …
阅读更多 »请问蛋白半衰期30小时,siRNA转染后大约多久收样合适呢?
既然目标蛋白的半衰期是30小时,说明它在细胞中相对稳定,也就是说,蛋白不会很快降解。 在使用siRNA干扰该蛋白的表达时,有几个关键时间点需要考虑: 一般siRNA作用流程: 转染后6–12小时:siRNA开始被细胞利用,mRNA水平开始下降。 24–48小时:mRNA水平通常显著降低(具体情况因靶基因和细胞类型而异)。 48–72小时:蛋白水平逐步下降,尤 …
阅读更多 »湖羊起源、高繁殖力和环境适应性的基因组学研究(备注:填补了很多空白,有意义的文章)
文献标题 Genomic Insights into the Origin, High Fecundity and Environmental Adaptation of Hu Sheep (湖羊起源、高繁殖力和环境适应性的基因组学研究) 发表期刊与影响因子 期刊名称:Advanced Science 影响因子:15.1(根据2025年JCR数据) 一、文献 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享