首先siRNA由于只 …
阅读更多 »测定病毒滴度时,是使用 HEK293 细胞,还是用目的细胞?
测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞测 …
阅读更多 »测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞测 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多,因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内,只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »转染siRNA后,通常是会影响细胞的基因表达,但是否可以重新铺板要考虑几个因素。一般情况下,如果转染后需要重新铺板,建议采取以下步骤: 转染后的时间点:siRNA的效果一般需要在转染后24-48小时才能显现,因此在这个时间段内,你不应该轻易处理细胞。若重新铺板,需要确保转染后的时间足够,能让siRNA充分发挥作用。 细胞状态:如果在转染后细胞健康状况良好,并 …
阅读更多 »共转染实验中,判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式,具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式: 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因(如GFP、RFP等),通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。这种方法不仅可以评估质粒的转染效率,还可以间接反映出质粒的表达能力。 优势:快速、简便,能够同时评估转染效率和蛋白表达。 …
阅读更多 »