英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
首先siRNA由于只 …
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外泌体介导的NF-κB c-Rel靶向治疗在加速角膜伤口愈合中的作用
文献标题 Accelerating corneal wound healing using exosome-mediated targeting of NF-kB c-Rel 采用英格恩产品的实验部分 文献背景 角膜损伤的临床问题： 角膜上皮完整性对视力至关重要，损伤后易引发炎症、感染甚至失明。 糖尿病患者的挑战：近50%患者角膜愈合延迟，易感染。 现有疗法 …
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细胞污染的心得体会
细胞培养的质量好坏是 …
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小鼠胚胎成纤维细胞的培养
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细胞冻存的7个注意事项
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活细胞的显微计数方法及步骤
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转化细胞在软琼脂中的生长
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30个关于CCK-8的Q＆A
Q1: 一个孔中应接 …
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TUNEL分析
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细胞周期测定实验有哪些，怎么做?
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细胞凋亡检测
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细胞周期与细胞凋亡分析
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问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
阅读更多 »使用单细胞和空间转录组技术揭示脑出血铁死亡机制
文献标题 Single-cell and Spatial Transcriptomics Reveals Ferroptosis as The Most Enriched Programmed Cell Death Process in Hemorrhage Stroke-induced Oligodendrocyte-mediated White Matt …
阅读更多 »转染实验加药问题，做荧光定量是不是铺板的时候加药24小时后转染，做wb就是转染12小时后加药呢？
答：你描述的策略（铺板加药做qPCR，转染后加药做WB）是合理的，并且遵循了两种检测方法对时间需求的不同逻辑：qPCR关注转录早期/中期，WB关注蛋白积累的中/后期。 这不是唯一方案： qPCR： 有时也可以在转染后某个时间点（如6-12小时）加药，再培养足够时间（如再培养18-36小时）后收样，总处理时间也可能达到24-48小时。这取决于药物起效速度和你想 …
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