英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如，RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸，葡萄糖)，维生素，无机盐，和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »ECL发光液与五味子提取物对胆汁淤积的肝保护作用研究
胆汁淤积症是一种由胆汁形成或分泌障碍引起的具有毒性胆汁酸滞留的临床综合征。各种肝病由胆汁淤积发展而来，包括胆道闭锁、原发性硬化性胆管炎和原发性胆汁性肝硬化。石胆酸（lca）是一种有毒、疏水的二级胆汁酸，主要由鹅去氧胆酸的细菌7α-去氢氧化作用在肠道内形成。胆汁淤积症患者的LCA水平升高。LCA处理后的啮齿类动物可发生胆汁淤积和肝损伤，因此大鼠已被 …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »如何达到更好的siRNA转染效率？
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »弓形虫效应子GRA4调控免疫和肿瘤治疗的研究
文献标题：The Toxoplasma Effector GRA4 Hijacks Host TBK1 to Oppositely Regulate Anti-T. Gondii Immunity and Tumor Immunotherapy 影响因子：《Advanced Science》最新数据确认，2023年IF约为15.1） 文献概要 该研究探讨了弓 …
阅读更多 »siRNA转染后细胞出现死亡是什么原因？
siRNA转染后细胞死亡，原因也是多样的，如脂质体毒性，转染浓度过高，转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生，这种情况下就需要适当优化转染条件；可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂，如Entranster试剂，另外，如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的，出现细胞死亡 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与槲皮素对更年期大鼠卵巢抗氧化能力影响的研究
绝经是女性衰老的重要标志，卵巢是对衰老最敏感的器官。槲皮素是一种潜在的抗氧化剂和自由基清除剂，广泛存在于水果、蔬菜和树叶中。然而槲皮素对卵巢衰老的作用尚不清楚，其抗氧化作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与槲皮素对更年期大鼠卵巢抗氧化能力影响的研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（entranster）与ADAM2沉默对异氟醚诱导的认知功能障碍的影响研究
认知功能障碍包括学习、注意力和记忆力方面的缺陷，通常被认为是系统性红斑狼疮最常见和最不易理解的神经精神症状。帕金森病（PD）和阿尔茨海默病（AD）是由认知功能障碍引起的一类广为人知的疾病。轻度认知障碍通常在早期AD中表现出来。有报告表明，诸如颜色辨别缺陷等症状能够部分反映认知功能障碍。据报道，包括异氟醚在内的挥发性麻醉剂对以麻醉后认知缺陷为特征的认知功能障碍 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »电转染实验过程中易出现的问题
不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构致密比稳定 …
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