英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
肝再生是肝损伤后恢复的重要过程，是肝部分切除术（PHx）后的一种很有前景的临床策略。五味子醇乙（Schisandrol B，SOLB）是从华中五味子提取的一种生物活性成分，对小鼠药物性肝损伤具有明显的肝保护作用。然而，SOLB对PHx肝再生的影响尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与五味子醇乙促进肝再生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如，RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸，葡萄糖)，维生素，无机盐，和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程，包括基因突变或表观遗传变化等多种因素，导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明，慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关，而许多流行病学研究表明，慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内 …
阅读更多 »Nature Communications | 中国药科大学齐炼文教授团队报道：治疗II型糖尿病的新策略
齐炼文教授团队在《Nature Communications》期刊发表了题为“Inactivation of NF-κB2 (p52) restrains hepatic glucagon response via preserving PDE4B induction”的II型糖尿病治疗最新研究成果。该研究采用了RNA体内转染试剂（Entra …
阅读更多 »RNA转染与小干扰RNA在HeLa细胞中的潜在抗病毒作用研究
柯萨奇病毒B3（CVB3）是病毒性心肌病最重要的致病因子，但目前尚无特异性抗病毒药物。小干扰RNA（siRNA）通过转录后基因沉默，已被用作抗病毒治疗策略。现分享一篇RNA转染（Entranster）与小干扰RNA在HeLa细胞中的潜在抗病毒作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素，细胞在电场的作用下，膜通透性增加或是形成小孔，以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此，一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值，其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外，还可以 …
阅读更多 »细胞RNA转染的建议
为了做好RNA转染实验，提出几点关于细胞RNA转染实验的建议，供大家参考： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中，可能导致严重的神经功能障碍，甚至死亡，在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡，并且在脑缺血中，自噬作用在累积。自噬作用是复杂的，取决于大脑的成熟度，区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内 …
阅读更多 »客户问：你好，如果电转以后抗性板子上一个没长，无抗的都长满了，这种情况是没电进去，需要增加次数吗，还是其他原因呢？
回答：“无抗的都长满”，说明细胞活性和数量没问题，基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点：质粒浓度是否足够（建议>100ng/μL）、抗性基因是否匹配（如氨苄不能用于表达AmpR的质粒）、抗性板浓度是否正确（过高会杀死阳性克隆）。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒，但残留的盐 …
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