英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观 …
阅读更多 »高滴度反转录病毒和慢病毒载体的制备
一、试剂 CaCl2 溶液( 2mol/L )、完全培养基、DMEM 培养基、乙醇（或异丙醇） (70% )、胎牛血清( FBS )、HBS 溶液(2X)、HEPES (2.5mmol/L, pH 7.3)、OptiMEM+ 1 ％青霉素／链霉素( P/S )、OptiMEM , 无P/S、pCMVDΔR8.91 质粒、pUMVC 质粒、pVSV- G 质粒 …
阅读更多 »siRNA转染进细胞有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »体内转染与细胞死亡因子4/NF-κB和猪心脏功能障碍研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的和重要的临床现象，急性冠状综合征（ACS），和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究
富亮氨酸重复激酶2（LRRK2）是家族性和突发性帕金森病（PD）的遗传原因，它与神经元死亡、囊泡运输、线粒体功能障碍和炎症有关。然而，其在脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体构建研究
Ｎｅｍｏ样激酶（ｎｅｍｏ-ｌｉｋｅｋｉｎａｓｅ，ＮＬＫ）属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在ＮＬＫ的同源蛋白，其结构存在高度的相似性，显示ＮＬＫ在进化过程中十分保守。研究显示，ＮＬＫ能够结合并磷酸化一系列转录因子，参与多个信号通路的调节，其中包括与发育过程密切相关的信号途径Ｗｎ …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与STAT3和髓源性抑制细胞研究
髓源性抑制细胞（MDSC）是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献，研究中指出，STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的，研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与甜菊渣提取物改善D-半乳糖诱导衰老小鼠的氧化应激研究
衰老被定义为是机体内部环境的稳定，生理功能和代谢过程不可避免的退化的一个过程。许多疾病与衰老有关，如帕金森病、糖尿病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病、骨质疏松症、骨关节炎和多种癌症。随着老龄化社会的到来，健康越来越受到重视。氧化应激是由活性氧自由基和抗氧化剂不平衡引起的生物过程，可能导致脂质、蛋白质和DNA的氧化损伤，最终导致死亡。科学证据表明，氧化应激在衰老过 …
阅读更多 »体内转染与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导 …
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