英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时Hela细胞的电转染条件是： 对于0.2 cm电转杯，细胞密度为3×10^6 cells/ml，DNA用量为2μg，电转液体积为100μl，电压为130V， 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯，细胞密度为3×10^6 cells/ml，DNA用量为5μg，电转液体积为250μ …
阅读更多 »ECL发光液与锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白，调节多种细胞过程，包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用，与大量蛋白质相互作用，MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇ECL发光液（enlight）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与急性髓系白血病细胞系U937研究
白血病是儿童和青年常见的造血系统恶性肿瘤之一。急性髓系白血病（AML）主要由造血系统中原始骨髓细胞恶性集落增殖所引起，其特征是骨髓母细胞异常增殖和抑制正常造血细胞的生长。尽管造血干细胞移植和一些新药的出现对AML有一定的治疗作用，但除了急性早幼粒细胞白血病外，对于其他类型的AML仍然没有可治愈的治疗。因此，寻 …
阅读更多 »DNA转染与基于de novo设计蛋白DS119的TNFa结合蛋白合理设计研究
蛋白质-蛋白质相互作用的合理设计是创造新型蛋白质药物、诊断探针或调节细胞信号通路的有力工具。SH3和PDZ结构域等小型模块化支架在调节蛋白质相互作用中起着重要作用，因此这些结构域在蛋白质设计中的应用已被广泛研究。De novo蛋白质设计为工程定制蛋白质功能提供模板，为合成生物学研究提供正交蛋白质相互作用网络。已经开发出各种计算方法来引入已知蛋白 …
阅读更多 »siRNA转染效率低的原因有哪些？
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
阅读更多 »ECL发光液与HSV-SOCS4和细胞因子风暴研究
溶瘤病毒（ovs）是一种基因工程病毒，选择性地复制并杀死癌细胞，是一种新型的抗肿瘤治疗方法。该方法作为癌症治疗剂具有许多优势，如基于机制的选择性、介导肿瘤细胞死亡的可能性以及在肿瘤部位表达额外的治疗转基因的可能性。由于OVS是为肿瘤内注射而设计的，这种独特的癌症治疗通常与宿主的抗肿瘤免疫（免疫病毒治疗）结 …
阅读更多 »如何得到更高的DNA细胞转染效率？
我认为，要想更高的细胞DNA转染效率，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »RNA转染（entranster）与miRNA-183促进黑质神经元凋亡研究
帕金森病是一种常见的神经系统疾病，是典型的纹状体功能障碍模型。它是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病的特征之一是黑质多巴胺能神经元的逐渐丧失。帕金森病患者通常有震颤、僵硬和运动迟缓的症状。遗传因素和环境因素已被纳入帕金森病的病因。对下丘脑核进行高频脑深部刺激是一种流行的外科治疗方法，但不适用于早期的PD，发展中国家的患者也无法获得。现分享一 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与大鼠脑外伤后大脑皮层环状RNA变化研究
创伤性脑损伤（TBI）可分为初始损伤和继发损伤两个阶段。继发性损伤可使初始损伤恶化，导致炎症反应增强和细胞死亡增加，导致神经功能缺陷。初始损伤不能改变，但通过有效的治疗可以减轻继发损伤。虽然在过去几十年里已经做出了许多努力，但脑外伤仍然是一种严重的疾病，死亡率和发病率都很高，而且现有的治疗策略也很有限，这给社会和家庭带来了严重的经济负担。脑损伤的复杂生物学机 …
阅读更多 »腺病毒适用于哪些细胞？
重组腺病毒（AdV）是一种复制缺陷的腺病毒载体系统，在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体基于人腺病毒5型（Ad5），其基因组是36 kb长的线性双链DNA。腺病毒可通过自身的纤维（fiber）和细胞表面的受体结合被内吞进入细胞，然后从内吞体（endosome）转移到细胞质和细胞核内，借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装。一 …
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