英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol，看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗？
关于使用嘌呤霉素筛选标记（puromycin resistance marker）的慢病毒（lentivirus）或逆转录病毒（retrovirus）进行病毒滴定（virus titration）的 protocol，确实有不少不同的做法，这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是，有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考，下面是整理的一个 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化，骨关节退行性病变已成为高发疾病，其中代表性疾病之一为骨性关节炎（osteoarthritis, OA）。最近研究表明：WISP-１ 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-１ 在正常软骨和滑膜中几乎不表达，而在退变的软骨及滑膜（如OA）中WISP-１异常增高，通过诱导ＭＭＰs及aggrecanas …
阅读更多 »SARDH调控T细胞代谢与癌症治疗（IF21.8）
文献标题：SARDH in the 1-C metabolism sculpts the T-cell fate and serves as a potential cancer therapeutic target 期刊：Cellular & Molecular Immunology 影响因子：21.8 概要：本研究通过泛癌单细胞转录组分析，发现线 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与LncRNA拯救肝损伤并促进肝细胞增殖研究
肝损害对人类健康产生不利影响，在世界范围内发病率很高。它可由多种有毒物质引起的，例如酒精和活性氧。持续性肝损伤可导致大范围肝细胞损害，伴随严重纤维化和不可逆性肝硬化，常导致死亡。影响肝损害的很多因素现在仍不清楚，这阻碍了治疗。因此，更好地了解肝损伤的相关因素对于治疗相关的肝脏疾病至关重要。现分享一篇ECL发 …
阅读更多 »shRNA转染后，什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后，进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素，包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说，在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说： 24小时后：在这个时间点，可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA，这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »体内转染与Trim2和神经炎症和认知缺陷研究
神经炎症作为衰老过程的主要特征，参与了包括阿尔茨海默病（AD）在内的多种衰老相关疾病的发病机制。髓样细胞触发受体2（TREM2）是一种新发现的AD风险基因，通过调节炎性细胞因子的释放调节外周组织的炎症过程。然而，到目前为止，Trim2在与神经相关的神经炎症、认知缺陷和AD样神经病理学中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与髓系细胞触发受 …
阅读更多 »体内转染siRNA（Entranster）与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征，神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制，包括阿尔茨海默氏病（AD）。触发受体表达髓系细胞（TREM）2是一种新的AD致病基因，但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA（Entranster-in vivo）敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献，文献 …
阅读更多 »英格恩体内转染试剂助力几种常见脑部疾病的研究
文章1：LncRNA TUG1 Repressed Angiogenesis by Promoting the Ubiquitination of HuR and Inhibiting Its Nuclear Translocation in Cerebral Ischemic Reperfusion Injury 期刊：Advanced Science 影 …
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