英格恩技术资料

1.细胞密度 　　一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 　　这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 　　还有，尽量选择无 …

      鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤，每年全球发病率约为1/10万。组织学上，鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌，包括鳞状细胞癌（SCC）、腺癌和腺样囊性癌，倒置乳头状瘤（IP）是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%，但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此，探索ips …

这是个很实际的问题。在转染实验中，荧光标记良好说明转染效率高，但如果qPCR在24小时没有观察到预期的基因敲低效果，可能存在以下几种情况： 1. 延长收样时间可能是一个方向 有些siRNA或shRNA介导的敲低效果在48小时甚至72小时后才会明显，因为： mRNA的半衰期可能较长； 敲低并不等于马上降解已有的mRNA； 目标蛋白的表达也可能滞后。 建议： 设 …

     Kexin样蛋白属于枯草杆菌蛋白酶家族。几种真菌的Kexin样蛋白已经被研究。缺乏KEXIN样蛋白的突变体表现出如细胞壁缺陷、异常极性等较强的表型，以白色念珠菌为例，其毒力会降低。然而，只有几种蛋白质被确认为Kexin样蛋白酶在这些真菌物种中的底物。Kexin样蛋白在这些真菌物种的形态发生中的作用尚不清楚。现 …

慢性脑缺血（CCI）可引起慢性缺血性神经损伤，它参与痴呆的发展，如阿尔茨海默病（AD）和血管性痴呆（VAD）。CCI导致持续性和进行性认知损伤和神经元损伤，其中海马神经元受损尤其严重。因此，对慢性脑缺血机制的研究可能为CCI治疗提供一种潜在的创新途径。现分享一篇体内转染（entranster）与缺血小鼠神经元凋亡调节机制研究的文献，以供参考。 文献地址：ht …

我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1，  质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功 …

      卒中尤其是缺血性卒中，可能导致严重的神经功能障碍，甚至死亡，在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡，并且在脑缺血中，自噬作用在累积。自噬作用是复杂的，取决于大脑的成熟度，区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内 …

       siRNA转染后细胞死亡，原因也是多样的，如脂质体毒性，转染浓度过高，转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生，这种情况下就需要适当优化转染条件；可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂，如Entranster试剂，另外，如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的，出现细胞死亡 …

一、编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多，根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。 (一)挂牌法：将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上，将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。 (二)打号法：用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打 …

可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …