英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究
抗氧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），可通过消除花生四烯酸（AA）代谢网络产生的氧化物质来解决炎症问题。上调其活性已被认为是一种有前途的炎症干预策略。现分享一篇DNA转染（Entranster）与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究的文献，旨在研究GPX4激活剂对AA代谢网络和炎症相关通路的影响。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与烟曲霉N-聚糖加工,形态发生及毒性研究
Kexin样蛋白属于枯草杆菌蛋白酶家族。几种真菌的Kexin样蛋白已经被研究。缺乏KEXIN样蛋白的突变体表现出如细胞壁缺陷、异常极性等较强的表型，以白色念珠菌为例，其毒力会降低。然而，只有几种蛋白质被确认为Kexin样蛋白酶在这些真菌物种中的底物。Kexin样蛋白在这些真菌物种的形态发生中的作用尚不清楚。现 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA Pvt1调控骨髓源抑制细胞的免疫抑制活性研究
骨髓源抑制细胞（MDSC）通过显著阻断T细胞诱导的抗肿瘤反应参与肿瘤诱导的免疫抑制，从而影响肿瘤免疫治疗的效果。改变MDSC分化和功能的治疗可以部分恢复抗肿瘤免疫反应。长非编码RNA浆细胞瘤变异体易位1（lncrna-pvt1）是多种癌症类型的潜在癌基因。然而，目前还没有完全阐明lncrna-pvt1是否参与MDSCs的调节。 现分享一篇RNA …
阅读更多 »基因敲除实验和动物体内转染实验（entranster-invivo）对比
基因敲除动物 Entranster-in vivo 技术方法 同源重组等方法获得基因敲除动物，然后进行实验 直接将核酸与转染试剂混合，注射到动物体内 单次实验周期 10～20个月 3天 稳定性 一般 …
阅读更多 »Plos one 2015：肺癌细胞凋亡的调控——ENTPD5
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高。 肺癌被认为是一种遗传性疾病，其中异常的内源性致病基因的表达造成基因组不稳定，增强肿瘤细胞的活力和侵袭性。尽管成功治疗原发性恶性肿瘤，仍有在1/4以上的术后患者复发、转移。 ENTPD5是一种内质网酶，水解UDP为UMP，促进蛋白的N …
阅读更多 »Theranostics | 关于1型糖尿病的新发现
复旦大学儿童医院儿科研究所的团队在《Theranostics》上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetesmellitus”的论文。文章阐明了 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与中性粒细胞气道炎症研究
吸入糖皮质激素，主要是皮质类固醇，目前治疗哮喘最有效的方法。然而，这种疗法去无法阻止重症哮喘或者顽固性哮喘的发展，被称作是非嗜酸细胞性哮喘（NEA）。NEA的特点是中性粒细胞（PMN）数目增加，并伴有单核细胞/巨噬细胞、肥大细胞和淋巴细胞相关的炎症反应。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与中性粒细胞气道炎症研究的文献，以 …
阅读更多 »siRNA转染（engreen）与树突状细胞表观遗传修饰研究
根据不同的环境，树突状细胞（DC）可能变现为活跃或耐受性，但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染（Entranster-R4000）与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献，显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs（DC）分化为活性或耐受DC。
阅读更多 »ECL发光液与重组弓形虫CDPK3接种对实验性弓形虫保护性免疫研究
弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体，可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
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