运用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行动物体内转染实验时,由于局部注射容易造成药液分布不均,在注射的近端,药液浓度高,效果明细;远端,药液浓度低,效果低一些。所以,一方面,需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织,另一方面,后续实验取样时,在保证实验的情况下,尽量取注射区域附近的组织,不取或者少取药液覆盖差的组织,以增加实验效果。
阅读更多 »siRNA细胞转染注意事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »瞬时转染后,划痕实验的最佳时间
瞬时转染后,划痕实验的最佳时间取决于几个因素,包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说,常见的策略如下: 1. 24 小时后划痕(常规选择) 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平,因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因,同时细胞仍然具有良好的活力,不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »高脂饮食与代谢紊乱机制研究(IF13.75)
标题:Short-term and long-term high-fat diet promote metabolic disorder through reprogramming mRNA m6A in white adipose tissue by gut microbiota 期刊:Microbiome 影响因子:2025年的影响因子为13.75 文献 …
阅读更多 »请问蛋白半衰期30小时,siRNA转染后大约多久收样合适呢?
既然目标蛋白的半衰期是30小时,说明它在细胞中相对稳定,也就是说,蛋白不会很快降解。 在使用siRNA干扰该蛋白的表达时,有几个关键时间点需要考虑: 一般siRNA作用流程: 转染后6–12小时:siRNA开始被细胞利用,mRNA水平开始下降。 24–48小时:mRNA水平通常显著降低(具体情况因靶基因和细胞类型而异)。 48–72小时:蛋白水平逐步下降,尤 …
阅读更多 »体内转染与microRNA-340-5p在肺动脉高压中的调控机制研究
肺动脉高压(PAH)是一种进行性、致命的疾病,其特征是肺动脉压和血管阻力持续增加,可能导致右心室衰竭,最终死亡。PAH的症状包括运动性呼吸困难、疲劳、胸痛和头晕。此外,当肺血管阻塞时,急性肺栓塞(APE)也可导致肺动脉高压。肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动脉平滑肌细胞(PASMCS)增殖导致晚期血管管腔阻塞。尽管近年来治疗取得了进展,但PAH仍 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究
流行性乙型脑炎病毒(JEV)感染是一种以神经元死亡为特征的脑组织疾病。然而,人们对其基本机制知之甚少。现分享一篇RNA转染(Entranster)与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与PTEN和冠状动脉微栓塞炎性反应研究
越来越多的证据表明,第十染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)基因参与了不同病理条件下的炎症调节。但是,PTEN与猪冠状动脉微栓塞(CME)后心脏功能的损害的关系尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与PTEN和 …
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体构建研究
Nemo样激酶(nemo-likekinase,NLK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在NLK的同源蛋白,其结构存在高度的相似性,显示NLK在进化过程中十分保守。研究显示,NLK能够结合并磷酸化一系列转录因子,参与多个信号通路的调节,其中包括与发育过程密切相关的信号途径Wn …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究
抗氧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4),可通过消除花生四烯酸(AA)代谢网络产生的氧化物质来解决炎症问题。上调其活性已被认为是一种有前途的炎症干预策略。现分享一篇DNA转染(Entranster)与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究的文献,旨在研究GPX4激活剂对AA代谢网络和炎症相关通路的影响。
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享