病毒载体最常用的有遍在启动子(ubiquitous promoters) 、细胞类型特异性启动子和多聚腺苷酸化信号。 遍在启动子• 人类CMV 立即早期启动子• 小鼠干细胞病毒(MSCV) 启动子• CMV 增强子与鸡β-actin 启动子融合的CAG 杂合启动子(也称为CGA 、CBA 或CB ;在不同版本中的长度不同)• 人类EF-α• 人类磷酸甘油酸激 …
阅读更多 »自噬依赖的Axin2+癌干细胞生成促进肝硬化中的肝癌发生
标题:Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis 影响因子:(Oncogene,2017年):7.385(2023年最新IF为8.0,JCR Q1区) 文献概要:自噬是肝硬化的一 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与DNMT1过表达和废用性骨质疏松研究
废用性骨质疏松(DOP)属于继发性骨质疏松症的一种,是由于骨骼的机械张力刺激减少而引起的局部或全身性骨量减少。可以出现于运动能力受限或功能障碍,也可能发生于创伤或者术后制动。有关DOP的确切机制尚不清楚,尽管表观遗传修饰可能是主要原因。最近,有研究表明DNA甲基转移酶(DNMT)蛋白可将胞嘧啶催化为5-甲基胞嘧啶(5mC),改变DNA的表观遗传状态。现分享一 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA(siRNA)是通过RNA干扰(RNAi)在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具,由于RNAi利用天然途径,即在蛋白质翻译发生之前,在转录后水平上关闭基因表达,因此,siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染,需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗?这个和做2个质粒共转染有什么区别?
进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多,因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内,只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与miRNA-183过表达促进黑质神经元凋亡研究
帕金森病是一种常见的神经系统疾病,是典型的纹状体功能障碍模型。它是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病的特征之一是黑质多巴胺能神经元的逐渐丧失。帕金森病患者通常有震颤、僵硬和运动迟缓的症状。遗传因素和环境因素已被纳入帕金森病的病因。对下丘脑核进行高频脑深部刺激是一种流行的外科治疗方法,但不适用于早期的PD,发展中国家的患者也无法获得。现分享一 …
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »ECL发光液与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中线粒体依赖性凋亡研究
据报道,早期脑损伤(EBI)是蛛网膜下腔出血(SAH)患者高死亡率和不良预后的主要原因,细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近,有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白(txnip)将内质网应激(ER应激)与神经元凋亡联系起来,并加重EBI。然而,其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液(enlight)与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与结直肠癌中硼替佐米抗癌活性研究
多种化疗药物通过激活内源性凋亡信号通路促进肿瘤细胞死亡。这条通路是由线粒体功能障碍调节,这是通过一个复杂的过程,受B细胞淋巴瘤2‑(Bcl‑2)家庭成员和其他细胞蛋白之间复杂的相互作用所控制。Bcl‑2相关X蛋白(Bax)是一种促凋亡蛋白,是内在的细胞凋亡信号通路的重要组成部分。缺乏bax的患者可能由于内源性凋亡信号通路受损而对化疗不那么敏感。现分 …
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