英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
冠状动脉微栓塞（CME）是急性心肌梗死（AMI）急诊经皮冠状动脉介入治疗的常见并发症，发生率为15%～20%。它可以直接导致“无血流”或“血流缓慢”。它是AMI患者长期预后不良和主要心脏不良事件的独立预测因子。研究表明，CME引起的局部心肌炎症是导致进行性心功能不全的主要原因。现分享一篇体内转染（Entranster）与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心 …
阅读更多 »怎样提高悬浮细胞的siRNA转染效率？
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成 …
阅读更多 »做慢病毒感染实验前，你需要哪些知识储备？
慢病毒载体的构建： 慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成，即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白；载体成分则与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列，同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转 …
阅读更多 »RNA转染与MDSC细胞和原发性干燥综合征研究
原发性干燥综合征（PSS）是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的，主要是唾液腺和泪腺，导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚，但许多研究已经证实树突状细胞（DCS）、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现，Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞（MDSC）是具有免疫抑制 …
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体的构建与鉴定研究
Ｎｅｍｏ样激酶（ｎｅｍｏ-ｌｉｋｅｋｉｎａｓｅ，ＮＬＫ）属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在ＮＬＫ的同源蛋白，其结构存在高度的相似性，显示ＮＬＫ在进化过程中十分保守。研究显示，ＮＬＫ能够结合并磷酸化一系列转录因子，参与多个信号通路的调节，其中包括与发育过程密切相关的信号途径Ｗｎｔ和Ｎｏｔｃｈ等。Ｋｏｒｔｅｎｊａｎｎ等研究发现，ＮＬ …
阅读更多 »ECL发光液多长时间失效
早期的ECL发光液很容易失效，一般质量较差的发光液，1个月以后，发光能力就逐步减弱了，有的发光液3个月以后就完全失效了。这样会出现，用同一瓶发光液，结果有差异，影响实验结论的现象。一定要选择至少3个月-6个月质量稳定的发光液，比如英格恩的Enlight发光液。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究
丹参酮ii-磺酸钠（ds-201）是丹参酮ii-a的水溶性衍生物，可诱导血管舒张并激活BKca通道。为了探讨ds-201在BKca通道上的作用机制，现分享一篇ECL发光液（enlight）与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究的文献，以供参考。 文献地址：https://www.nature.com/articles/aps201485
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究
SIRT3是NAD+依赖性的线粒体蛋白脱乙酰酶，参与调节中枢代谢和线粒体蛋白稳定。SIRT3在肾透明细胞癌（CCRCC）中被下调，这是肾癌的最常见形式。尽管ccRCC具有典型的Warburg样表型、线粒体功能障碍和脂肪沉积增高的特征，但SIRT3是否参与肿瘤的发生和发展尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究 …
阅读更多 »RNA细胞转染实验影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究
GATA结合蛋白4（GATA-4）是GATA转录因子家族的成员，在正常大脑中表达，参与神经炎症反应和衰老。然而，关于GATA-4是否与脑出血（ICH）引起的脑损伤有关的研究很少。现分享一篇体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究的文献，以供参考。其研究的目的是在体内和体外探讨GATA-4在ICH诱导的继发性脑损伤（SBI）中的 …
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