英格恩技术资料

悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …

端粒的维持受端粒酶活性的调控，包括端粒酶全酶及其相关蛋白。端粒酶的活性在细胞中被精确控制，其失调是癌症的特征之一。端粒酶催化亚单位端粒酶逆转录酶（hTERT）在端粒酶活性中起重要作用。 现分享一篇ECL发光液（enlight）与Polo样激酶1（PLK1）通过影响端粒酶逆转录酶的稳定性上调端粒酶活性研究的文献，以供参考。

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …

地球上生物的生理活动维持着大约24小时的昼夜节律，这是由核心昼夜节律基因家族调控的。核心昼夜节律钟由许多调节因子组成，如时钟和bmal1，它们形成一个异二聚体，并有助于下游基因的激活。或者，一些调节因子（如per/cry）通过抑制时钟/bmal1活性来调节昼夜节律。这种转录翻译反馈是由核心昼夜节律分子介导的，并产生昼夜节律。现分享一篇体内转染（entrans …

多氯化二苯硫化物（PCDPSS）是一类可以相互作用并激活芳基烃受体（AHR）的化学药物。之前的研究结果表明，PCDPSS可引起肝脏氧化应激。然而，有关PCDPSS基因毒性的信息是有限的。现分享一篇RNA转染（entranster）与多氯代二苯硫醚通过ahrcyp1a1途径可诱导活性氧和基因毒性研究的文献，以供参考。

一、消化液的采集 (一) 唾液 1. 直接抽取法 在急性实验中， 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。 2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液，要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外,将带有导 …

       髓源性抑制细胞（MDSC）是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献，研究中指出，STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的，研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …

       膀胱癌（BC）是一种由膀胱中某些细胞不受控制的恶性增殖引起的疾病。在中国泌尿生殖系统肿瘤发病率排名第一，在西方仅次于前列腺癌。随着根治性BC切除综合治疗的不断进展，临床疗效有了很大提高，但晚期BC术后易发生复发转移，其5年生存率仍徘徊在45%左右。化疗能有效抑制前列腺癌的复发和转移，但耐药制约了其临床应用，严重影响了临床疗效。众所周知，BC的化 …

回答： 1. 启动子竞争与转录因子的“稀释” 如果你在共转染中加入的是一个非表达质粒（载体骨架）或特定的辅助质粒，目标表达量反而增高，可能是因为单转染时目标质粒浓度过高，导致细胞内的转录因子被“过度征用”或者触发了细胞的应激机制。 适当的质粒比例：有时候少量的质粒反而能获得更稳定的转录效率，避免了转录机器的饱和。 2. 辅因子或辅助蛋白的协同作用（核心原因） …