英格恩技术资料

目的基因不能直接整合到大多数真核细胞，常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺病毒的原理以及特别前面的文章中都有介绍过，可以搜索关键字查看。今天主要介绍病毒感染细胞的实验流程。 1.构建目的基因到载体 构建手段 一般是根据原始质粒信息确定克隆方案，有以下两种手段。 1）如果原始 …

       RAS级联的异常激活在人类肝细胞癌（HCC）中普遍存在，与ras的罕见突变无关。然而，在肝癌发生过程中，ras级联与肝脂肪变性的关系仍在研究中。现分享一篇ECL发光液（enlight）与饮食诱导的肝脂肪变性通过CPT1α激活ras促进肝癌发生研究的文献，以供参考。

慢病毒载体的构建： 慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成，即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白；载体成分则与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列，同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转 …

       脑内出血（Intracerebral hemorrhage，ICH）可引起有效的氧化应激反应和炎症过程，异甘草素（Isoliquiritigenin）是一种类黄酮物质，可以激活核因子E2相关因子2（Nrf2）介导的抗氧化系统，负调控核因子B（NF-κBκκ）和NOD受体家族。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与异甘草素和 …

        血管性痴呆（VD）是老年痴呆的第二大病因，仅次于阿尔茨海默病（AD），在西方国家占所有痴呆病例的17.6%，研究表明在世界东部地区，包括中国和日本人口中，认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD，以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前，VD的确切发病机制仍不清楚。因此，有必要更详细 …

缝隙连接蛋白（Cx）构成脊椎动物的缝隙连接（GJ），可调节重要的细胞过程，包括电耦合，增殖，分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致，GJ和CX被公认为肿瘤抑制；恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中，转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡（有毒的“旁观者效应”）。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …

       外伤性脊髓损伤（SCI）是造成死亡和终身残疾的主要原因。然而，对脊髓损伤的病理过程还没有完全了解。F-BOX/WD重复序列包含蛋白5（FBXW5），是scf型E3泛素连接酶复合物的一个亚单位，在调节各种病理方面具有重要作用。然而，对于fbxw5对SCI进展的影响知之甚少。 现分享一篇体内转染（entranster）与fbxw5减少可减轻脊髓损伤 …

      神经性疼痛（NPP）是许多中枢神经系统损伤或疾病的结果。以往的研究表明，NPP是由p2x4受体介导的，p2x4受体在背根神经节（DRG）的卫星胶质细胞（sgcs）上表达。儿茶酚丁胺（CST）是一种神经内分泌多功能肽，可能参与了NPP的发病机制。现分享一篇体内转染（engreen）与儿茶酚丁胺影响神经性疼痛机制研究的文献，以供参考。 文献地址：ht …

下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …

肝肺综合征（HPS）以肺内血管扩张（IPVD）引起的动脉氧合缺陷为特征。肺血管重塑（PVR）是IPVD的一个重要病理特征，然而，有关该过程的内在机制的细节尚不明确。现分享一篇RNA转染（Entranster）与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究的文献，以供参考。