英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
最常见的卵巢癌是上皮性癌，其中致癌的病因仍然是?以捉摸的。ANO1/TMEM16A是Ca2+激活的Cl-通道（CACS）的成员，已证实其可以促进上皮性癌的发生，然而其是否在卵巢癌的发病机制中发挥作用尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与ANO1通道和卵巢癌研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与缺氧诱导因子和肾再生研究
虽然哺乳动物的肾再生发生在在整个生命期中，但哺乳动物的成熟的肾脏并不能充分再生，尤其是肾小球。以往的研究表明，肾部分切除术后的脱细胞肾支架可增强肾的再生。现分享一篇体内转染（Entranster）与缺氧诱导因子和肾再生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染过程中常见问题及解答
1.RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转 …
阅读更多 »Crispr/Cas9腺病毒构建流程
Crispr/Cas9 简介 CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前，来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白（含有两个核 …
阅读更多 »丹参酮IIA磺酸钠抗糖尿病血管衰老机制研究
标题 Sodium Tanshinone IIA Sulfonate alleviates vascular senescence in diabetic mice by modulating the A20-NFκB-NLRP3 inflammasome-catalase pathway 文献概要 该研究探讨了丹参酮IIA磺酸钠（STS）通过调节A20-N …
阅读更多 »成骨细胞分泌白细胞介素-9支持巨核细胞生成（IF：20.3）
标题 Osteoblasts support megakaryopoiesis through production of interleukin-9* 影响因子 该论文发表于《Blood》期刊，其2022年的影响因子为20.3，属于血液学领域的顶级期刊。 文献摘要 本研究揭示了成骨细胞通过分泌白细胞介素-9（IL-9）支持巨核细胞生成和血小板形成的新机制 …
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »体内转染的方法与免疫系统疾病多发性硬化（MS）研究
多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）是中枢神经系统的一种慢性脱髓鞘性神经变性疾病。虽然MS的确切发病机制尚不清楚，但CD4 + T细胞介导的自身免疫被认为是发病机制中最重要的方面之一。哺乳动物非编码microRNAs（miRNAs）可参与免疫系统的功能。miR-155的表达与病人多发性硬化症疾病的严重程度和小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（E …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
阅读更多 »做嘌呤霉素筛选滴定时，感染两天，puro杀3天，5天细胞长得很密原因和解决方法，另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难，能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗？
问题1：“感染两天，puro杀3天，5天细胞都长很密” 原因： 细胞分裂快（比如 293T）→ 在5天内即使有筛选，还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性，嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议： 缩短时间：感染 24h 后就加 puromycin，第 2 天开始杀，杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度：推荐加大稀释倍数：1:1000，1:5000，甚至 …
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