慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释: 慢病毒包装质量问题: 病毒滴度较低,导致感染效率不高,可能无法有效转导目标细胞。 病毒颗粒中没有足够的有效载体,影响敲降效果。 靶向序列设计问题: shRNA或sgRNA设计不合理,没有有效靶向目标基因的序列。 目标序列与基因组其他部位的相似性导致脱靶效应,影响敲降效果。 感染条件不佳 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因有哪些?
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »体内转染与microRNA-340-5p在肺动脉高压中的调控机制研究
肺动脉高压(PAH)是一种进行性、致命的疾病,其特征是肺动脉压和血管阻力持续增加,可能导致右心室衰竭,最终死亡。PAH的症状包括运动性呼吸困难、疲劳、胸痛和头晕。此外,当肺血管阻塞时,急性肺栓塞(APE)也可导致肺动脉高压。肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动脉平滑肌细胞(PASMCS)增殖导致晚期血管管腔阻塞。尽管近年来治疗取得了进展,但PAH仍 …
阅读更多 »体内转染与mir‐208b通过靶向cdkn1a调节细胞周期并促进骨骼肌细胞增殖研究
骨骼肌是人体内最丰富的组织。骨骼肌细胞发育复杂,受多种因素影响。大量的mirRNA(micrornas)被认为是肌发生的关键调节因子。MIR-208b是一种肌肉特异性的mirRNA,据报道与纤维类型测定有关。然而,MIR-208b是否对肌肉细胞增殖有影响尚不清楚。现分享一篇体内转染(entranster)与mir‐208b通过靶向cdkn1a调节细胞周期并促 …
阅读更多 »电转染时,指数衰减脉冲形式的电转条件是什么?
对于engreen的Entranster-E电转染试剂,当使用0.4cm比色杯时,大多数细胞类型的指数衰减脉冲条件在200-300V的电压范围和800-1000μF的电容范围内。对于0.2 cm比色杯时,其范围分别为80-160 V和800-1000μF。对于使用0.4 cm比色杯的电穿孔实验,测试电压范围 …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与YWK-II蛋白/APLP2稳定性研究
YWK-II蛋白/APLP2是一种进化上保守的蛋白家族的成员,包括淀粉样前体蛋白(APP)和淀粉样蛋白前体蛋白(APLP1)。已经表明YWK-II /APLP2在细胞存活方面可作为Müllerian抑制物(MIS)的一种新的G蛋白偶联受体。然而,调节YWK-II /APLP2蛋白的折叠和稳定性的因素尚未确定。现分享一篇siRNA转染(Entran …
阅读更多 »体内转染(entranster)与miR-202通过靶向rap1a调节神经性疼痛的进展研究
神经性疼痛是由影响神经系统的疾病或神经损伤引起的躯体感觉障碍。mirRNA(micrornas)在神经性疼痛的发生中起着关键作用。然而,MIR-202在神经性疼痛中的作用尚不清楚。 现分享一篇体内转染(entranster)与miR-202通过靶向rap1a调节神经性疼痛的进展研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与Polo样激酶1对端粒酶活性影响的研究
端粒的维持受端粒酶活性的调控,包括端粒酶全酶及其相关蛋白。端粒酶的活性在细胞中被精确控制,其失调是癌症的特征之一。端粒酶催化亚单位端粒酶逆转录酶(hTERT)在端粒酶活性中起重要作用。 现分享一篇ECL发光液(enlight)与Polo样激酶1(PLK1)通过影响端粒酶逆转录酶的稳定性上调端粒酶活性研究的文献,以供参考。 文献地址:http:// …
阅读更多 »ECL发光液与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究
衰老在心血管系统中表现出深刻的结构和生理变化。氧化应激是衰老过程中的一个重要因素,它与各种年龄相关的心血管疾病有关。然而,老化心脏中氧化应激的潜在机制仍不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sci-hub.shop/10.1016/j.bbrc.2 …
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