英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »FGF21通过SYK-NLRP3-PPARγ-CAT通路缓解体内外血管平滑肌细胞衰老
文献标题 《FGF21过表达通过调节SYK-NLRP3炎症小体-PPARγ-过氧化氢酶途径缓解糖尿病小鼠血管平滑肌细胞衰老》 FGF21 overexpression alleviates VSMC senescence in diabetic mice by modulating the SYK-NLRP3 inflammasome-PPARγ-catal …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »CCK8实验之前，是否需要先检测一下培养基和CCK8是否会反应？
需要，可用一个孔检测一下，因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质，在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK8 是否反应。一般正常在的OD 值应该在0.4 以下。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染（Entranster）方法研究小鼠急性肝衰竭
急性肝衰竭（ALF）是由炎症介导的肝细胞损伤过程，是由肝细胞凋亡和出血坏死引起的临床综合征。急性肝衰竭经常是由病毒性肝炎，药物或有毒物质的摄入，或肝缺血再灌注损伤等引起的。ALF的预后非常差，除了肝移植以外，目前还没有有效的治疗方法。现分享一篇体内转染（Entranster）研究小鼠急性肝衰竭的文献，以供参 …
阅读更多 »体内转染与阿尔茨海默病模型NLRP1依赖的神经炎症研究
NLRP1炎症小体(NAcht leucinerich-repeat protein-1，NLRP-1)是最早被鉴定的炎症小体，包括NLRP1、caspase-1以及炎症小体相关的接头蛋白ASC（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD， …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »为什么选择AAV作为基因治疗的病毒载体？
AAV，即腺相关病毒载体，属于细小病毒科依赖病毒属。野生型AAV感染人宿主细胞后，可以整合到人类19号染色体的AAVS1位点，但AAV不会引起人类疾病。实际上，我们市面常见的AAV并不是野生型AAV，而是重组AAV（rAAV)。 AAV和AAV载体的基因组结构（图片来源：Semantic Scholar） 目前来看，rAAV相比较其他病毒载体，未发现 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小鼠睾丸间质细胞类固醇生成研究
间质细胞对男性生殖发育至关重要，可调控雄激素以及中间激素的分泌。虽然microRNAs（miRNAs）在精子发生过程中起着重要作用，是目前对间质细胞中miRNA对类固醇的调节知之甚少。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与小鼠睾丸间质细胞类固醇生成研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染后细胞出现死亡是什么原因？
siRNA转染后细胞死亡，原因也是多样的，如脂质体毒性，转染浓度过高，转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生，这种情况下就需要适当优化转染条件；可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂，如Entranster试剂，另外，如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的，出现细胞死亡 …
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