2026年 9 月 23日, 星期三
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英格恩技术资料

siRNA细胞转染操作步骤

下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …

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体内转染与LncRNA AK016739抑制成骨细胞分化和骨形成研究

中老年妇女绝经后骨质疏松症研究的发病率为50%,然而现有疗法的效果并不理想。新的证据证明长非编码RNA(lncrnas)与多种生理和病理过程相关,包括发育、致癌和骨的形成。然而,有关lncRNAs调节骨形成的报道相对有限。现分享一篇体内转染(entranster)与LncRNA AK016739抑制成骨细胞分化和骨形成研究的文献,以供参考。

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siRNA转染效率不理想的原因有哪些?

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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siRNA转染过程中常见问题及解答

1.RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转 …

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ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体构建研究

       Nemo样激酶(nemo-likekinase,NLK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在NLK的同源蛋白,其结构存在高度的相似性,显示NLK在进化过程中十分保守。研究显示,NLK能够结合并磷酸化一系列转录因子,参与多个信号通路的调节,其中包括与发育过程密切相关的信号途径Wn …

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