1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »Inflammation | 西安交通大学附属医院:促进心肌损伤的杀手
《Inflammation》期刊报道了MiR-23a通过直接靶向CX43和调节有丝分裂吞噬作用参与心肌缺血/再灌注损伤。题为“MiR-23a Is Involved in Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Directly Targeting CX43 and Regulating Mi …
阅读更多 »如何做好细胞电转染实验?
要想做好细胞的电转染实验,应注意以下几点: 1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 选择合适的细胞 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内 …
阅读更多 »MYOD诱导MEG3促进猪卫星细胞分化
标题:MYOD induced lnc-MEG3 promotes porcine satellite cell differentiation via interacting with DLST 期刊: Epigenetics 文章概要 本研究揭示了长链非编码RNA MEG3 在猪卫星细胞(PSCs)分化中的新机制:转录因子 MYOD 直接结合 MEG3 …
阅读更多 »EntransterTM-in vivo体内转染试剂
EntransterTM-in vivo体内转染试剂 产品介绍 EntransterTM-in vivo是英格恩生物公司(Engreen Biosystem Co,Ltd.)最新研发合成的用于动物体内转染的转染试剂。EntransterTM-in vivo动物体内转染试剂可将小片断RNA如siRNA,miRNA,mimic、inhibitor或DNA转染到动 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与YAP和衰老细胞的存活研究
虽然化疗药物可以诱导衰老以阻止肿瘤细胞进一步分裂,但衰老也可以主要通过衰老相关的分泌表型促进肿瘤发生。因此,应立即清除衰老的肿瘤细胞,防止耐药性和复发。现分享一篇ECL发光液(enlight)与YAP和衰老细胞的存活研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sci-hub.shop/10.1016/j.canlet.2016.02.04 …
阅读更多 »靶向eIF4G1根除胰腺癌研究
文献标题 Reprograming immunosuppressive microenvironment by eIF4G1 targeting to eradicate pancreatic ductal adenocarcinoma 期刊与影响因子 期刊: Cell Reports Medicine 影响因子:14.3(2024年) 英格恩(Engree …
阅读更多 »电转染实验时,细胞密度是多少合适?
进行电穿孔实验时.,需确定每种细胞类型的最佳细胞密度,以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说,在含电转试剂的终体系中,电穿孔时的细胞密度一般在1-10×106细胞/ml范围内。对于悬浮细胞,最好是接近10×106细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞,建议的细胞密度为1-5×106 …
阅读更多 »细胞电转染效率不高的原因是什么?
细胞电转染效率不高,有可能是以下原因造成的: 1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享