如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常情况下可以通过流式细胞仪来实现,步骤如下: 收集细胞:首先收集感染后的细胞,并用适当的缓冲液进行重悬。 去除死细胞:可以通过加PI(碘化丙啶)或7-AAD等染料来排除死细胞,这样有助于提高检测的准确性。 流式检测:使用流式细胞仪时,选择FITC通道(通常是FL1通道),因为GFP的荧 …
阅读更多 »体内转染文章背后的故事
节省时间 河北医科大学附属二院的老师在临床实践中发现在多发性硬化症患者样本中有一个miRNA上调的现象。针对该miRNA的mimics很容易得到,怎么导入动物呢?他们想到了用英格恩动物体内转染试剂,将mimics与体内转染试剂混合后,尾静脉注射小鼠,几天后就可以观察结果,进行PCR,病理等研究,结果发现该miRNA的上调影响到一些免疫细胞的改变,从而导致多发 …
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究
哺乳动物的肾再生已被报道贯穿其一生。损伤后,存活的成熟肾细胞或肾干细胞迁移到受损区域,增殖并重新分化为新的体细胞。然而,实现临床意义的再生已被证明是极具挑战性的,因为肾再生修复是不完整的,不能完全恢复肾脏自己功能。现分享一篇体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »银屑病中真皮间充质干细胞通过Ang1/Tie2通路促进血管生成
文章标题 《在银屑病中真皮间充质干细胞通过激活血管生成素通路促进HMEC-1中的血管生成》 英文标题:Dermal mesenchymal stem cells promote angiogenesis in HMEC-1 via activation of the angiopoietin 1/Tie2 pathway in psoriasis 期刊与影响 …
阅读更多 »慢病毒倍比稀释测定活性的实验中,DAY2天时,把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时,用把细胞原培养基吸取出去吗,还是直接把病毒液添加进去?
好问题!在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度(titer) 的时候,DAY2 加入病毒时是否更换培养基,确实是一个关键点,对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式,以及推荐做法: 推荐操作:先吸掉培养基,再加病毒(常规做法) 流程简述(以DAY2为节点): DAY1:铺板细胞(如293T、HEK293,常用于测滴度); DAY2:感染操作 吸掉旧培养基; …
阅读更多 »Molecular Immunology | 上海交通大学医学院: 自身免疫性脑脊髓炎或将得到有效缓解
该研究团队首次表明了eIF4E在促进Th17细胞方面的积极作用,miRNA-467b通过靶向eIF4E抑制Th17细胞的分化和功能,从而缓解了自身免疫性脑脊髓炎。该项研究成果发表在《Molecular Immunology》期刊上(“miRNA-467b inhibits Th17 differentiation by targeting eIF4 …
阅读更多 »专利:一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法及应用
文章概要 该专利发明了一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法,通过体内转染技术在小鼠卵巢中特异性过表达RNA(如lncRNA),为研究RNA在卵巢中的功能提供了技术支持。该方法避免了尾静脉注射的无靶向性缺陷,显著减少了转染试剂用量,且操作微创,对小鼠生存无影响。 采用英格恩产品的实验部分 转染试剂: 使用北京英格恩生物科技有限公司的Entranster …
阅读更多 »揭秘RNAi,缔造实验神话
用siRNA进行transient transfection不稳定,几代细胞以后,症状就会消失,所以在转染几天(1-3)后要立刻抽提蛋白,进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染,如果质粒含有抗生素位点,可以进行筛选,获得较稳定的细胞株系,但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染(infection),抗生素筛选后,可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …
阅读更多 »体内转染(entranster)与lncRNAuc.48+对2型糖尿病大鼠肝糖原的影响研究
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组代谢性临床综合征,随着社会的发展和人们生活水平的提高,糖尿病的患病率逐年升高。在发达国家,糖尿病患病率已达3% ~7%,成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第4位需要优先考虑的疾病,已成为世界第5位死亡主因。我国糖尿病人群的构成,以2型糖尿病为主,占糖尿病人群的90%以上,严重影响着人民健康和社会发展 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享