英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
CCK8基于水溶性四唑盐WST8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），WST8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料（formazan）。甲臜染料能够溶解在组织培养基中，与活细胞数量成正比。通过比色，可以动态地量化活细胞的数量，从而对细胞增 …
阅读更多 »体外转录法制备dsRNA中，怎么知道mRNA的靶区域在哪
在体外转录法制备dsRNA（双链RNA）的过程中，确定mRNA的靶区域是关键的一步。以下是一些常用的方法和步骤，以帮助确定mRNA的靶区域： 1. 目标基因的选择 首先，确定你想要抑制或研究的目标基因。你需要有这个基因的完整序列信息（通常从基因数据库中获得，如NCBI）。 2. 设计siRNA或shRNA序列 设计小干扰RNA（siRNA）或小发夹RNA（s …
阅读更多 »慢病毒感染与可溶性程序性死亡1蛋白和类风湿关节炎研究
类风湿性关节炎(RA)是一种关节炎症性疾病，其特征是慢性滑膜炎、进行性侵蚀和软骨破坏，导致关节变形和疼痛以及关节功能丧失。RA影响全世界0.5-1%的成年人，每年每100000人中诊断出有5_50人患有该病，而且在女性和老年人群中的发病率也更高。如果未经治疗，风湿性关节炎可能导致关节损伤、残疾和生活质量下降，此外还有心血管疾病和其他的并发症。该病的确切病因尚 …
阅读更多 »电转效率受哪些因素影响？
电穿孔效率受以下几种因素的影响： 外加电场的强度。电压过低，培养细胞质膜的改变不足以允许DNA 通过； 电压过高，细胞会受到不可逆的损伤。对于大多数哺乳动物细胞系， 电压250~ 500V/cm时可达到最高瞬时表达水平。通常经过电穿孔， 20% ～ 50％的细胞能够存活（根据台盼蓝拒染法的检测结果） ( Patterson 1979; Baum et al. …
阅读更多 »英格恩RNA体内转染产品相关文献清单
采用RNA体内转染试剂EntransterTM– in vivo发表的文献，研究方向包括大脑、神经、脊髓、眼睛、鼻、口腔、心脏、支气管、肺部、胃、胰、肝脏、肠、骨、肌肉、肾脏、膀胱、乳腺、生殖系统、胸膜、免疫系统、皮肤等各个方面。欢迎大家阅览与交流。 序号 研究方向 实验材料 文章题目 期刊 大脑 点击此处，打包下载所有大脑相关文献，提取码：btv9 1 大 …
阅读更多 »病毒载体的基本元件
反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区（即转录起始区，在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在）及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列（ψ）介导，而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与存活素和食管癌细胞放射增敏作用研究
食管癌在中国是一种常见的癌症。手术是食管癌的主要治疗手段，但放疗和化疗在临床分期上也有广泛的应用。放射治疗通常与化疗和靶向治疗相结合。然而，放射治疗效果仍然令人不满意，放射抗性在临床治疗中非常普遍，导致可能的治疗失败。因此，迫切需要提高放射敏感性的策略。现分享一篇ECL发光液（en …
阅读更多 »细胞RNA转染实验的一些建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究
微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰（PTMS），如脱酪氨酸和聚谷氨酰化，特别是在非结构化羧基末端尾（CTTS）中。然而，更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与肺微血管内皮功能研究
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA（Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
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