首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染来 …
阅读更多 »体内转染siRNA (Entranster)与肺微血管内皮功能研究
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输,其在血管内皮(VE)-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知,血管内皮(VE)-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件,可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA (Entranster-in vivo)的方法研究肺微血管内皮功能的文献,以供参考。
阅读更多 »Cancer Gene Therapy | 郑州大学附属医院:卵巢癌患者或将迎来新的希望
研究团队通过RNA体内转染实验(EntransterTM-in vivo, Engreen)发现沉默MAFG-AS1的表达可以减缓EMT的进程,转移,并且通过抑制NFKB1介导的细胞凋亡可减少卵巢癌细胞IGF1表达。这项成果发表在了《Cancer Gene Therapy》期刊上(“LncRNA MAFG-AS1 promotes the malignant …
阅读更多 »体内转染(entranster)与Clock基因突变体通过抑制NFKB的乙酰化来促进骨关节炎研究
地球上生物的生理活动维持着大约24小时的昼夜节律,这是由核心昼夜节律基因家族调控的。核心昼夜节律钟由许多调节因子组成,如时钟和bmal1,它们形成一个异二聚体,并有助于下游基因的激活。或者,一些调节因子(如per/cry)通过抑制时钟/bmal1活性来调节昼夜节律。这种转录翻译反馈是由核心昼夜节律分子介导的,并产生昼夜节律。现分享一篇体内转染(entrans …
阅读更多 »血液中髓源性单核细胞抑制肿瘤的研究
标题: MicroRNA 449c Mediates the Generation of Monocytic Myeloid-Derived Suppressor Cells by Targeting STAT6 期刊: Molecules and Cells 影响因子: 6.5 使用英格恩产品 (Entranster™-in vivo) 的 …
阅读更多 »DNA转染与免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究
白血病在全球发病率呈上升趋势,我国白血病发病率为十万分之三,每年约新增40 000 例患者。白血病表现为骨髓造血组织恶性增生,形成大量异常的白细胞,广泛浸润组织器官,引起多种组织器官不可逆损害,直接威胁患者生命。白血病的转移、复发与白血病细胞及其生长微环境相互作用密切相关。免疫毒素是一种由抗体或细胞因子与化学毒素耦合组成的融合蛋白。通过受体介导 …
阅读更多 »动物体内转染后,遗传性转能维持多久?
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染,对目标基因的改变,一般注射1次,可以维持7天左右。随后,随着转入的核酸的代谢,效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态,这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态,可以多次注射。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的,与环境因素和生活方式有关。值得注意的是,糖尿病似乎受到吸烟的严重影响,包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡,但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献,以供 …
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享