英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的血液恶性肿瘤，其特点是恶性浆细胞克隆性增殖，与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子（BAFF）在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原（BCMA）是BAFF …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与结直肠癌中硼替佐米抗癌活性研究
多种化疗药物通过激活内源性凋亡信号通路促进肿瘤细胞死亡。这条通路是由线粒体功能障碍调节，这是通过一个复杂的过程，受B细胞淋巴瘤2‑（Bcl‑2）家庭成员和其他细胞蛋白之间复杂的相互作用所控制。Bcl‑2相关X蛋白（Bax）是一种促凋亡蛋白，是内在的细胞凋亡信号通路的重要组成部分。缺乏bax的患者可能由于内源性凋亡信号通路受损而对化疗不那么敏感。现分 …
阅读更多 »体内转染与黄体酮减轻实验性APS小鼠胎盘损伤研究
APS是一种全身性自身免疫性疾病，在持续存在APL的情况下，可引起妊娠疾病和反复的全身血管血栓形成，累及动脉和静脉血管。APL是一系列异质性磷脂结合体。临床相关APL包括狼疮抗凝剂（LA）、抗心磷脂（ACL）和抗β2GPI。APL与β2GPI之间的抗原反应过程是APS发病机制中的关键环节。但APL介导的流产和组织损伤的具体机制尚未得到充分研究。 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成病毒稀释液。 注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
阅读更多 »转基因动物的那些事儿，想说你为什么这么难？
1980年底Gordon等人首次将克隆的基因注入小鼠受精卵原核，然后移植于假孕的母鼠输卵管,培育出第1个转基因动物。这种将外源性基因用实验方法插入动物生殖细胞的基因组而获得具有插入基因特性，并能正常繁衍的动物称为转基因动物 ( transgenicanimals)。转基因技术是生物学领域最新重大进展之一，已能渗透到生物学、医学、畜牧学等学科的广泛领域。转基因 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 中国医科大学报道：谁在保护我们的脊椎神经？
该团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了题为“MiR-128-3p Alleviates Spinal Cord Ischemia/Reperfusion Injury Associated Neuroinflammation and Cellular Apoptosis via SP1 Suppression …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送和药代动力学性质。现分享一篇体内转染（Entran …
阅读更多 »做嘌呤霉素筛选滴定时，感染两天，puro杀3天，5天细胞长得很密原因和解决方法，另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难，能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗？
问题1：“感染两天，puro杀3天，5天细胞都长很密” 原因： 细胞分裂快（比如 293T）→ 在5天内即使有筛选，还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性，嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议： 缩短时间：感染 24h 后就加 puromycin，第 2 天开始杀，杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度：推荐加大稀释倍数：1:1000，1:5000，甚至 …
阅读更多 »动物体内转染实验，局部注射，应如何取样观察结果？
由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的情况下，尽量取注射区域附近的组织，不取或者少取药液覆盖差的组织，以增加实验效果。 如需了解更多关于动物体内转染试剂的信息，请点击https://www.engr …
阅读更多 »体内转染siRNA （Entranster）与肺微血管内皮功能研究
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster-in vivo）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
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