2026年 5 月 6日, 星期三
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测定病毒滴度时,是使用 HEK293 细胞,还是用目的细胞?

测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞测 …

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RNA转染(entranster)与miRNA-183促进黑质神经元凋亡研究

帕金森病是一种常见的神经系统疾病,是典型的纹状体功能障碍模型。它是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病的特征之一是黑质多巴胺能神经元的逐渐丧失。帕金森病患者通常有震颤、僵硬和运动迟缓的症状。遗传因素和环境因素已被纳入帕金森病的病因。对下丘脑核进行高频脑深部刺激是一种流行的外科治疗方法,但不适用于早期的PD,发展中国家的患者也无法获得。现分享一 …

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RNA转染(entranster)后沉默现象不明显怎么办?

可能原因: 1. RNA与转染试剂比例不佳。可进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳。 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。 3. RNA效率不高。选择最优RNA,并采用已知高效的RNA做对照。 4. RNA酶污染。建议无RNA酶和内毒素的吸头、离心管和溶液等材料和实验器具。 5. 转染后培养时间不够。在mRNA水平可以到48 小时以后验证结果,在蛋白水 …

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慢病毒感染后,未能实现相关敲降的原因是什么?

慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释: 慢病毒包装质量问题: 病毒滴度较低,导致感染效率不高,可能无法有效转导目标细胞。 病毒颗粒中没有足够的有效载体,影响敲降效果。 靶向序列设计问题: shRNA或sgRNA设计不合理,没有有效靶向目标基因的序列。 目标序列与基因组其他部位的相似性导致脱靶效应,影响敲降效果。 感染条件不佳 …

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细胞DNA转染实验步骤

下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …

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ECL发光液与低浓度TBBPA促进子宫内膜癌细胞侵袭和迁移研究

      四溴双酚A(TBBPA)是目前全球生产量和使用量最大的溴代阻燃剂之一, 也是新型潜在的拟增热点POPs和环境内分泌干扰物, 被广泛应用于电子电器产品、纺织品、泡沫家具及建筑材料等, 以提高阻燃性。目前一些研究表明, 在空气、土壤、水体和水体沉积物等环境中已检测到TBBPA的存在。      TBBPA已经被国际癌症研究机构(IARC)列为致癌物质 …

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体内转染(entranster)与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究

钠/氢交换因子1(NHE1)在生理条件下维持中枢神经系统(CNS)的细胞内PH(phi)稳态中起着重要作用,并与脑缺血引起的神经元死亡和细胞内Na离子和Ca离子超载有关。然而,其在蛛网膜下腔出血(SAH)诱发的早期脑损伤(EBI)中的作用和潜在机制尚未得到充分探讨。现分享一篇体内转染(entranster)与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究的文献,以供参考。 …

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电转染实验过程影响因素

1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …

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