慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点: ● 感染范围广 …
阅读更多 »成功转染siRNA的主要关键点有什么?
1.设计合成有效的siRNA RNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要,最优的设计可以用最小的工作浓度取得满意的沉默效果,减少副反应的发生。siRNA的设计可以通过检索,优先选用经过验证的siRNA或设计多对siRNA。需要强调的是,需要同时设置阴性对照以排除非特异沉默现象和阳性对照以确认整个实验体系的有 …
阅读更多 »体内转染siRNA在病毒性心肌炎小鼠模型中的抗病毒研究
Coxsackie Virus属于小RNA 病毒科,肠道病毒(enteroviruses)属,是导致病毒性心肌炎的主要病毒之一,多发于儿童和青少年,可引起急性心力衰竭,部分可发展为扩张性心肌病,严重危害少年儿童健康,目前临床缺乏特异有效的药物。RNA 干扰自1998 年《Science》杂志报道以来,已被广泛 …
阅读更多 »树枝状纳米颗粒治疗眼科葡萄膜黑色素瘤研究
标题:Efficacy and safety of dendrimer nanoparticles with coexpression of tumor necrosis factor-α and herpes simplex virus thymidine kinase in gene radiotherapy of the human uveal mel …
阅读更多 »RNA转染与多氯代二苯硫醚诱导活性氧和基因毒性研究
多氯化二苯硫化物(PCDPSS)是一类可以相互作用并激活芳基烃受体(AHR)的化学药物。之前的研究结果表明,PCDPSS可引起肝脏氧化应激。然而,有关PCDPSS基因毒性的信息是有限的。现分享一篇RNA转染(entranster)与多氯代二苯硫醚通过ahrcyp1a1途径可诱导活性氧和基因毒性研究的文献,以供参考。
阅读更多 »如何解决病毒感染细胞效率低的难题?
病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用病毒感染增强剂Envirus-LV来提高感染效率。 病毒感染细胞本来效率就较低,整个过程相对复杂难操作,一般一次花费周期至少两三个月,多则几个月到十几个月不等,经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染效 …
阅读更多 »动物体内转染,不同的注射方法,如何评估干扰效率?
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射方法会明显影响效果。比如,大脑神经细胞的体内转染,可以采用尾静脉注射和侧脑室注射,用侧脑室的方法就好得多。再比如,肺部的体内转染,用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与靶器官的接触越直接越充分,效 …
阅读更多 »BHK-21细胞的电转染条件是什么?
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时BHK-21细胞的电转染条件是:对于0.2 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为150V, 电容为950μF。对于0.4 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为25 …
阅读更多 »动物体内转染试剂的特点是什么?
动物体内转染试剂Entranster-in vivo的特点是: ●最快3天可以得到结果,核酸+转染试剂,注射动物,完成转染。 ● 肝、肾、心、肺,血液系统,神经系统,生殖系统,皮肤…成功应用。 ● 可方便、快捷更换不同的小片断RNA进行动物试验。 ● 方法先进,抛弃病毒,众多实验室应用,稳定可靠。 ● 比使用病毒节省90%以上费用,时间缩短到3天!
阅读更多 »体内转染(entranster)与ADAM2沉默对异氟醚诱导的认知功能障碍的影响研究
认知功能障碍包括学习、注意力和记忆力方面的缺陷,通常被认为是系统性红斑狼疮最常见和最不易理解的神经精神症状。帕金森病(PD)和阿尔茨海默病(AD)是由认知功能障碍引起的一类广为人知的疾病。轻度认知障碍通常在早期AD中表现出来。有报告表明,诸如颜色辨别缺陷等症状能够部分反映认知功能障碍。据报道,包括异氟醚在内的挥发性麻醉剂对以麻醉后认知缺陷为特征的认知功能障碍 …
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