英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂：普鲁卡因，此药毒性小，见效快，常用于局部浸润麻醉，用时配成0.5％～1％；利多卡因，此药见效快，组织穿透性好，常用1％～2％溶液作为大动物神经干阻滞麻醉，也可用0.25％～0.5％ …
阅读更多 »动物实验系列篇章之三——实验动物的麻醉方法
EXP BIOL MED 2015 : 冠状动脉微栓塞！ PDCD4/NF-κB有关?
广西医科大学附属第一医院心内科的老师在临床实践中发现，冠状动脉微栓塞（CME）是急性心肌梗死的常见并发症，发生率约10%～20%，是影响微心肌微循环灌注的主要原因。 NF-κB激活是CME引起的心肌炎的重要因素。在早期的研究中，广西医科大学附属第一医院心内科的老师就发现，Pdcd4介导的信号通路在CME引起的炎症可能发挥一个重要的角色。 在研究中，老师们使用 …
阅读更多 »细胞转染应该什么时候加抗生素？
细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染外源核酸不整合到宿主染色体中，在短时间内在基因或蛋白水平产生较高的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。稳定转染是相对需要建立某些基因整合到染色体DNA的细胞系来说的，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B 磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选， …
阅读更多 »Neuropharmacology | 治疗阿尔兹海默症的新视角
近日，中国药科大学姚文兵教授课题组在《Neuropharmacology》期刊上发表了“MicroRNA-23b attenuates tau pathology andinhibits oxidative stress by targeting GnT-III in Alzheimer’s disease”的研究论文，揭示了MicroRNA-2 …
阅读更多 »Plos one 2015：肺癌细胞凋亡的调控——ENTPD5
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高。 肺癌被认为是一种遗传性疾病，其中异常的内源性致病基因的表达造成基因组不稳定，增强肿瘤细胞的活力和侵袭性。尽管成功治疗原发性恶性肿瘤，仍有在1/4以上的术后患者复发、转移。 ENTPD5是一种内质网酶，水解UDP为UMP，促进蛋白的N …
阅读更多 »为什么脂质体转染试剂细胞毒性大？
细胞生物学的战友，应该对细胞转染不陌生，没做过也见别人做过。有个问题想跟大家讨论一下，就是脂质体毒性的问题。我们都知道做一次细胞转染不容易，从准备细胞到目的细胞筛选，过程相当繁琐。所以如何提高转染效率成为了关键，但是常用的脂质体转染要求无血清转染，而且有很大的细胞毒性，对转染效率和实验结果都会产生影响，那为什么脂质体转染试剂毒性这么大？ 已有众多的文献报道， …
阅读更多 »动物实验系列篇章之六——实验动物各种体液、骨髓的采集方法
一、消化液的采集 (一) 唾液 1. 直接抽取法 在急性实验中， 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。 2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液，要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外,将带有导 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之七—— 实验动物的处死
当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。 一、蛙 类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住，露出头部,左手执蛙，并用食指按压其头部前端，拇指按压 …
阅读更多 »细胞转染为什么不能加血清？
看过很多细胞转染的高手，在做真核细胞转染时，都是在把核酸和转染试剂的混合液加入细胞表面以前，将融合的细胞的含血清的培养液弃去，用无血清培养基清晰后再加入混合物，4-6h后再换含血清的培养基。这是为什么呢？为什么这些转染试剂要求不含血清呢？ 传统的转染试剂有一定的细胞毒性，在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如，阳离子脂质体。带正电的脂 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之一——实验动物的抓取和固定
在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物的活动，使动物处于安静状态，工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时，要爱惜动物，使动物少受痛苦。 一、小鼠 小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手 …
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