英格恩技术博客 专注转染等实验

为什么脂质体转染试剂细胞毒性大?

细胞生物学的战友,应该对细胞转染不陌生,没做过也见别人做过。有个问题想跟大家讨论一下,就是脂质体毒性的问题。我们都知道做一次细胞转染不容易,从准备细胞到目的细胞筛选,过程相当繁琐。所以如何提高转染效率成为了关键,但是常用的脂质体转染要求无血清转染,而且有很大的细胞毒性,对转染效率和实验结果都会产生影响,那为什么脂质体转染试剂毒性这么大?

 

已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):362-8);如与线粒体膜发生作用(J Biol Chem. 1989 Jan 25;264(3):1508-15);转染siRNA造成脱靶效应等等。细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小,脂质体这些作用是造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。这已引起了许多研究者的注意。

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虽然人们早已发现脂质体对细胞的毒性,对研究的影响,但由于一直没有更好的方法尤其是更高效的转染方法代替脂质体,所以脂质体转染试剂一度应用非常广泛。同时,人们也一直在寻找更有效、毒性小同时对研究影响也小的转染试剂。由于脂质类转染试剂对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,目前众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优秀的试剂产品上市,如Engreen公司的EntransterTM系列转染试剂。

 

使用脂质体等转染试剂时,一般要求无血清,因为脂质体含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。Engreen公司的EntransterTM系列转染试剂只浓缩包裹核酸不会将血清带入细胞,所以可以有血清转染,同时由于血清的存在,有利于细胞的状态维护,故能提高转染效率。

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