首先siRNA由于只 …
阅读更多 »瞬时转染后,划痕实验的最佳时间
瞬时转染后,划痕实验的最佳时间取决于几个因素,包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说,常见的策略如下: 1. 24 小时后划痕(常规选择) 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平,因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因,同时细胞仍然具有良好的活力,不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »Q1: 一个孔中应接 …
阅读更多 »瞬时转染后,划痕实验的最佳时间取决于几个因素,包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说,常见的策略如下: 1. 24 小时后划痕(常规选择) 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平,因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因,同时细胞仍然具有良好的活力,不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞测 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多,因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内,只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »转染siRNA后,通常是会影响细胞的基因表达,但是否可以重新铺板要考虑几个因素。一般情况下,如果转染后需要重新铺板,建议采取以下步骤: 转染后的时间点:siRNA的效果一般需要在转染后24-48小时才能显现,因此在这个时间段内,你不应该轻易处理细胞。若重新铺板,需要确保转染后的时间足够,能让siRNA充分发挥作用。 细胞状态:如果在转染后细胞健康状况良好,并 …
阅读更多 »