英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
首先siRNA由于只 …
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慢病毒感染，铺板后24小时感染，病毒量是不是按铺板时细胞数的二倍计算的？
一般来说，慢病毒感染时，病毒量的计算主要依据目标MOI（Multiplicity of Infection）以及当前的细胞数量。铺板后24小时的细胞数量可能会有所增加，具体情况取决于细胞的增殖速度。 如果在铺板24小时后进行感染，通常需要考虑细胞的增殖情况来调整病毒量。如果您的细胞在这段时间内大约增殖了一倍，那么可以按铺板时细胞数的两倍来计算所需病毒量，以确 …
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细胞生长速度非常快，现在在密度20-30%时就开始转染，但是到了60小时后细胞密度已经非常高，几乎没有空隙。如果继续等待，是否会导致细胞状态不佳，从而影响到实验中蛋白的表达效果。
细胞密度确实会影响转染效率和蛋白表达。如果细胞密度过高，可能会导致以下问题： 营养和废物积累：高密度会导致培养基中的营养迅速消耗，废物积累增加，这会影响细胞的健康状态，进而影响蛋白表达。 转染效率降低：高密度时，转染试剂和DNA更难均匀分布，影响转染效率。 蛋白表达影响：过度拥挤的细胞状态可能导致蛋白表达效率下降，甚至可能出现表达异常。 建议： 调整转染密度 …
阅读更多 »可否使用慢病毒滴度测定方法来测定AAV（腺相关病毒）的滴度
一般来说，这种慢病毒滴度测定方法不适用于测定AAV（腺相关病毒）的滴度。原因如下： 病毒特性不同：慢病毒和AAV的结构、感染机制不同。慢病毒是逆转录病毒，而AAV是一种非整合的单链DNA病毒，两者的感染和表达方式差异较大。慢病毒的滴度通常通过转染宿主细胞后观察其表达水平来测定，而AAV通常使用其他方法。 检测方法的差异：AAV的滴度检测通常使用qPCR（定量 …
阅读更多 »请问siRNA转染后48h PCR已经敲低到30%以下，但是60h收蛋白，蛋白显著上调。是什么原因，如何在蛋白水平敲低呢？
对于您的问题，siRNA转染后48小时PCR显示基因表达水平已经显著降低到30%以下，但在60小时检测蛋白时，蛋白水平却出现显著上调，这种情况可能有以下原因和应对方法： 可能的原因： 蛋白降解滞后性：即使mRNA水平在48小时时已经显著下降，但蛋白的降解可能需要更长的时间。蛋白具有相对较长的半衰期，因此在mRNA水平下降之后，蛋白水平的下降会有一定的延迟。 …
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