英格恩技术资料

1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2.RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA和 …

      使用Entranster-E试剂进行电转染实验时，要求使用纯度高、无菌且序列正确的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。尝试在250-750nM最终浓度范围内的siRNA浓度。Engreen建议导入一个非靶向或无意义的siRNA控制序列，以验证siRNA的基因特异性。此外，针对具有多个siRNA序列的基因可确保产生的表型不是由于脱靶效应所致 …

你遇到的这个问题在慢病毒（lentivirus）介导的RNA干扰实验中其实挺常见，下面我们逐步分析下可能的原因： 实验现象简述： siRNA转染敲得很有效（蛋白水平明显降低）； **将siRNA序列构建进慢病毒（shRNA形式）**后感染细胞； 荧光表达很强（说明病毒成功进入细胞，且有表达）； 但目标蛋白并未敲低，几乎没有 knockdown 效果。 可能原 …

      该团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表了题为“CircRILPL1 promotes muscle proliferation and differentiation via binding miR-145 to activate IGF1R/PI3K/AKT pathway”的论文。研究人员利用体内转染试剂（En …

       溶瘤病毒（ovs）是一种基因工程病毒，选择性地复制并杀死癌细胞，是一种新型的抗肿瘤治疗方法。该方法作为癌症治疗剂具有许多优势，如基于机制的选择性、介导肿瘤细胞死亡的可能性以及在肿瘤部位表达额外的治疗转基因的可能性。由于OVS是为肿瘤内注射而设计的，这种独特的癌症治疗通常与宿主的抗肿瘤免疫（免疫病毒治疗）结 …

脑出血（ICH）是一个严重的公共卫生问题，可导致成人的高致残率和死亡率。细胞凋亡是ICH后继发性脑损伤（SBI）的标志。哺乳动物不育系20样激酶-1（MST1）是一种细胞凋亡促进激酶，是Hippo信号通路的一部分，参与细胞死亡、氧化应激和炎症反应。然而，MST1在ICH诱导的SBI中的作用和潜在机制尚未完全清楚。现分享一篇体内转染（entranster）与M …

为了达到高的siRNA转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …

      该团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了题为“MiR-128-3p Alleviates Spinal Cord Ischemia/Reperfusion Injury Associated Neuroinflammation and Cellular Apoptosis via SP1 Suppression …

      Coxsackie Virus属于小RNA 病毒科，肠道病毒（enteroviruses）属，是导致病毒性心肌炎的主要病毒之一，多发于儿童和青少年，可引起急性心力衰竭，部分可发展为扩张性心肌病，严重危害少年儿童健康，目前临床缺乏特异有效的药物。RNA干扰自1998 年《Science》杂志报道以来，已被广泛 …

       程序性坏死是由多种蛋白介导的一种调节性坏死形式，包括肿瘤坏死因子α（TNF-α）和受体相互作用蛋白（RIPS）。TNF-α是一种重要的炎症分子，是程序性坏死通路中的起始信号，而RIP3可作为一种促使细胞程序性坏死的开关。蛛网膜下腔出血（SAH）是一种常见的出血性卒中类型，死亡率和致残率高。RIP3在许多中枢神经系统疾病中都有研究，但其在蛛网膜下 …