英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
腺相关病毒( adeno-associated virus，AAV) 是一类细小病毒，基因组为单链DNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。重组腺相关病毒（recombinant AAV, rAAV）是利用AAV2 型基因组与不同血清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体病毒载体，可将目的基因的CDS 区序列或者 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与ADAM2沉默对异氟醚诱导的认知功能障碍的影响研究
认知功能障碍包括学习、注意力和记忆力方面的缺陷，通常被认为是系统性红斑狼疮最常见和最不易理解的神经精神症状。帕金森病（PD）和阿尔茨海默病（AD）是由认知功能障碍引起的一类广为人知的疾病。轻度认知障碍通常在早期AD中表现出来。有报告表明，诸如颜色辨别缺陷等症状能够部分反映认知功能障碍。据报道，包括异氟醚在内的挥发性麻醉剂对以麻醉后认知缺陷为特征的认知功能障碍 …
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点？
一、原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »体内转染与mir‐208b通过靶向cdkn1a调节细胞周期并促进骨骼肌细胞增殖研究
骨骼肌是人体内最丰富的组织。骨骼肌细胞发育复杂，受多种因素影响。大量的mirRNA（micrornas）被认为是肌发生的关键调节因子。MIR-208b是一种肌肉特异性的mirRNA，据报道与纤维类型测定有关。然而，MIR-208b是否对肌肉细胞增殖有影响尚不清楚。现分享一篇体内转染（entranster）与mir‐208b通过靶向cdkn1a调节细胞周期并促 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关miRNA调节研究
表观遗传修饰在基因表达调控中起关键作用。为了了解表观遗传修饰在不同的环境中如何改变单核细胞来源的树突状细胞（DC）miRNA的表达，现分享一篇RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关miRNA调节研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状RNA研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观 …
阅读更多 »siRNA转染与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …
阅读更多 »siRNA转染实验的几点建议
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »体内转染试剂对大脑转染的应用及比较
今年6月份，苏州大学附属第一人民医院神经科学及脑神经研究所在《Critical Care Medicine》杂志发表了一篇影响因子为6.312的SCI文章《Cyclophilin A/Cluster of Differentiation 147 Interactions Participate in Early Brain Injury After Suba …
阅读更多 »体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究
缺血性中风是导致死亡和长期残疾的主要原因。为了克服临床治疗的局限性，迫切需要有前景的神经保护化合物。神经保护剂仅限于单一靶向药物，这进一步限制了其临床疗效。由于大脑特殊的能量需求，以线粒体为中心的能量微环境是缺血性脑卒中复杂病理学研究的新热点。现分享一篇体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究的文献，以供参 …
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