2026年 6 月 19日, 星期五
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siRNA转染答疑专题总结(下)

Q9: 刚开始做实验,准备把RNAi的片段转入染色体内稳定表达,不知道是shRNA还是siRNA哪个比较好而且效率比较高?另外,一个载体里同时放两个针对不同基因的shRNA会不会相互影响? A9: 稳定转染当然是shRNA。关于一个载体2个shRNA,涉及到2个shRNA的表达和加工的问题,关键还是2个shRNA都需要顺利表达的问题,这就和你的载体,以及2个 …

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siRNA转染效率不理想怎么办?

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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体内转染(engreen)与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究

       脑内出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)可引起有效的氧化应激反应和炎症过程,异甘草素(Isoliquiritigenin)是一种类黄酮物质,可以激活核因子E2相关因子2(Nrf2)介导的抗氧化系统,负调控核因子B(NF-κBκκ)和NOD受体家族。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与异甘草素和 …

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DNA转染(Entranster)与人结直肠癌细胞通路研究

瓜蒌提取物具有多种药用功能。最近,有报道称从瓜蒌中分离的一种丝氨酸蛋白酶TKP可以通过诱导细胞凋亡从而抑制人结直肠癌细胞的增殖。现分享一篇DNA转染(Entranster)与人结直肠癌细胞通路研究的文献,文献中研究了TKP对于大肠腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。

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ECL发光液(enlight)与新型抗癌药物抑制肺癌干细胞生长研究

       肺癌是男性和女性癌症相关死亡的主要原因。肺癌细胞中含有少量的具有干细胞样特征的癌细胞,被称为肿瘤干细胞(CSCs)。CSCs通常对当前的治疗性治疗更具抵抗力。因此,迫切需要开发一种新的能抑制CSCs生长的药物。现分享一篇ECL发光液(enlight)与新型抗癌药物SNG1153抑制肺癌干/祖细胞生长的研究 …

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细胞siRNA转染有哪些方法?

siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。

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慢病毒感染细胞常见问题分析

1.用于慢病毒感染的细胞接种量是多少? 根据细胞增殖的速度调整细胞接种量,以保证在感染后4天左右细胞刚好快长满培养皿底部为宜。 针对大部分细胞系:传代周期在2-3天,感染时细胞铺板的密度保持在20-30%左右,则72h后细胞增殖后铺板密度约在90%左右; 针对某些原代细胞: 由于细胞增长缓慢,可以在接种时提高汇合度到50%~60%,但要确保在感染后4天时细胞 …

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分步转染,先电转GFP-mRNA,表达很好,然后第二天电转了一个红色荧光DNA质粒,第三天观察的时候只看到了少数细胞有红色荧光,看不到绿色荧光了,这是怎么回事呀?按说GFP已经表达了,怎么还能消失了呢

根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …

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