2026年 8 月 5日, 星期三
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英格恩技术资料

lonza电转,同时电转DNA和RNA,其中RNA的转染效率降低很多,单独RNA,效率很高;共转的时候,RNA的总量是一样的,一个GFP的mRNA,所以可以通过荧光判断表达量,但是当加入DNA后,GFP的荧光就非常差了,用的程序是适用于mRNA的一个程序,有什么建议吗

单独电转mRNA(GFP)信号很好,但一旦同时把DNA一起电转,GFP荧光显著下降。这个往往不是“挤占表达资源”这么简单,更多是由“电转参数 + 细胞先天免疫反应 + 总核酸/盐负载”三方面共同导致。给你一个可操作、优先级排序的排障与优化清单(不需要额外设备就能尝试): 先做两件最快见效的事 把DNA量往下砍 10–100×(起始试 10 ng~100 ng …

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体内转染(Entranster)与缺氧诱导因子和肾再生研究

       虽然哺乳动物的肾再生发生在在整个生命期中,但哺乳动物的成熟的肾脏并不能充分再生,尤其是肾小球。以往的研究表明,肾部分切除术后的脱细胞肾支架可增强肾的再生。现分享一篇体内转染(Entranster)与缺氧诱导因子和肾再生研究的文献,以供参考。

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揭秘RNAi,缔造实验神话

用siRNA进行transient transfection不稳定,几代细胞以后,症状就会消失,所以在转染几天(1-3)后要立刻抽提蛋白,进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染,如果质粒含有抗生素位点,可以进行筛选,获得较稳定的细胞株系,但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染(infection),抗生素筛选后,可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …

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ECL发光液(enlight)与槲皮素对更年期大鼠卵巢抗氧化能力影响的研究

绝经是女性衰老的重要标志,卵巢是对衰老最敏感的器官。槲皮素是一种潜在的抗氧化剂和自由基清除剂,广泛存在于水果、蔬菜和树叶中。然而槲皮素对卵巢衰老的作用尚不清楚,其抗氧化作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与槲皮素对更年期大鼠卵巢抗氧化能力影响的研究的文献,以供参考。

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细胞电转染实验的几点建议

1.   电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2.   细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2 …

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腺相关病毒和其他病毒相比有哪些优势?

腺相关病毒( adeno-associated virus,AAV) 是一类细小病毒,基因组为单链DNA,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。重组腺相关病毒(recombinant AAV, rAAV)是利用AAV2 型基因组与不同血清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体病毒载体,可将目的基因的CDS 区序列或者 …

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DNA转染效率影响因素

细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度   一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态   这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …

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大肠杆菌电转后,4度涂抹到培养基板子上会导致死亡吗?细菌电转后是不是比细胞还脆弱啊?

这个问题问得很实际,也很关键,特别是在做质粒转化实验的时候容易遇到。 回答一:大肠杆菌电转后,4℃下操作是否会导致死亡? 不会直接导致大面积死亡,但确实会影响转化效率。 电转后的大肠杆菌处于一种“受伤”的状态,细胞膜被电击短暂打破,虽然迅速恢复,但暂时很脆弱。 如果在电转后没有及时给予复苏(比如在SOC、LB等液体培养基中摇床复苏30–60分钟),就直接在低 …

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RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究

机械刺激和生物因素协同调节骨的发育和再生,但其基础机制却知之甚少。微重力诱导骨丢失,这可能地与抗局部细胞因子的发展有关,包括胰岛素样生长因子1(IGF-1)。现分享一篇RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究的文献,以供参考。

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