英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
据报道，早期脑损伤（EBI）是蛛网膜下腔出血（SAH）患者高死亡率和不良预后的主要原因，细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近，有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白（txnip）将内质网应激（ER应激）与神经元凋亡联系起来，并加重EBI。然而，其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液（enlight）与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »siRNA转染常见问题及解答
问：siRNA导入细胞有哪些方法，哪种最好？ 答：siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。 问：哪种转染试剂效果好？ …
阅读更多 »TGF-β1诱导miR-133a抑制肺纤维化
标题: Transforming growth factor (TGF)-β1-induced miR-133a inhibits myofibroblast differentiation and pulmonary fibrosis 期刊: Cell Death and Disease 影响因子: 5.959 研究背景 特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与PRDX3和肝细胞癌研究
PRDX3是调节细胞氧化还原状态的线粒体过氧化物还原酶。据报道，PRDX3在肝癌中过度表达，但PRDX3在肝细胞癌（HCC）发生发展中的作用尚未得到很好的阐述。现分享一篇ECL发光液（enlight）与沉默PRDX3抑制肝癌细胞生长及促进细胞侵袭和细胞外基质降解研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞RNA转染实验的一些建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »电转染实验时，方波形式的电转条件是什么？
一般来说，方波脉冲的理论起始条件可通过指数衰减参数来确定，即在保持电容不变的情况下，将脉冲长度减半，电压增加约10%。之后的优化可在理论计算的脉冲电压附近以10 V为梯度增减。如果不知道指数衰减脉冲条件，可通过测试电压、电容和脉冲长度范围找到最佳的方波脉冲条件。对于engreen的Entranster-E …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与Trim2和神经炎症和认知缺陷研究
神经炎症作为衰老过程的主要特征，参与了包括阿尔茨海默病（AD）在内的多种衰老相关疾病的发病机制。髓样细胞触发受体2（Tyr2）是一种新发现的AD风险基因，通过调节炎性细胞因子的释放调节外周组织的炎症过程。然而，到目前为止，Trim2在与神经相关的神经炎症、认知缺陷和AD样神经病理学中的作用尚不清楚。现分享一 …
阅读更多 »USP3 在多器官炎症模型中的调控研究
文献标题：USP3 deubiquitinates and stabilizes the adapter protein ASC to regulate inflammasome activation 期刊信息：Cellular & Molecular Immunology (2022) 影响因子：22.096 (JCR Q1区，免疫学领域顶级期刊) …
阅读更多 »ECL发光液与siah2-nrf1轴调节肿瘤微环境重构和肿瘤发展研究
肿瘤细胞位于细胞组成和代谢特征高度异质的微环境中。肿瘤代谢异质性也被认为在肿瘤化疗抵抗、远处转移和肿瘤复发中起作用，会导致不良的临床结果。然而，作为细胞内代谢最重要的细胞器，对于线粒体如何对肿瘤微环境信号作出反应以及它们如何调节肿瘤代谢异质性，人们知之甚少。了解线粒体调控在肿瘤微环境中的作用对于破译肿瘤进展的分子基础至关重要。现分享一篇ECL发光 …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
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