需要,可用一个孔检测一下,因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质,在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK8 是否反应。一般正常在的OD 值应该在0.4 以下。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »多组学检测NEB基因CirlRNA促进牛的骨骼肌成研究
标题:”A Circular RNA Generated from Nebulin (NEB) Gene Splicing Promotes Skeletal Muscle Myogenesis in Cattle as Detected by a Multi-Omics Approach” 期刊:Advanced Science 影 …
阅读更多 »RNA转染与人鼻病毒1B基因敲除和干扰素应答的再激活研究
人鼻病毒(HRV)是属于Picornaviridae家族肠道病毒属的单链正义RNA病毒。它在20世纪50年代首次被发现。将近60年后,已经鉴定出超过100种血清型/基因型病毒。HRVs(HV-A,-B,-C)是所有年龄组,尤其是儿童中呼吸道感染最常见的原因,但尚未开发出有效的治疗HVS的药物。现分享一篇RN …
阅读更多 »慢病毒倍比稀释测定活性的实验中,DAY2天时,把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时,用把细胞原培养基吸取出去吗,还是直接把病毒液添加进去?
好问题!在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度(titer) 的时候,DAY2 加入病毒时是否更换培养基,确实是一个关键点,对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式,以及推荐做法: 推荐操作:先吸掉培养基,再加病毒(常规做法) 流程简述(以DAY2为节点): DAY1:铺板细胞(如293T、HEK293,常用于测滴度); DAY2:感染操作 吸掉旧培养基; …
阅读更多 »动物体内转染后,遗传性转能维持多久?
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染,对目标基因的改变,一般注射1次,可以维持7天左右。随后,随着转入的核酸的代谢,效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态,这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态,可以多次注射。
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与病理性色素沉着研究
皮肤色素沉着是通过黑色素细胞中黑色素的合成而形?的。黑素细胞是一种上皮细胞,主要位于表皮的基底细胞层,少数黑素细胞位于粘膜。由黑色素组成的色素颗粒可以分布和运输到邻近的角质形成细胞。黑皮质素-1受体(MC1R)的突变是人类皮肤晒黑和色素沉着的关键。现分享一篇DNA转染(Entranster)与病理性色素沉着研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA …
阅读更多 »siRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
阅读更多 »CCK8与胸苷结合检测之间是否有相关性?
有。然而,请注意由于CCK8使用的检测原理与胸苷检测的不同,因此结果可能不同。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
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