病毒转染原理及步骤 在细胞相关的实验操作中,对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞,通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率,以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤:1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起 …
阅读更多 »CCK8试剂的保存条件
在避光条件下CCK8 试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话,推荐在-20℃下保存。但是CCK8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收,从而影响检测结果,若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »Inflammation | 西安交通大学附属医院:促进心肌损伤的杀手
《Inflammation》期刊报道了MiR-23a通过直接靶向CX43和调节有丝分裂吞噬作用参与心肌缺血/再灌注损伤。题为“MiR-23a Is Involved in Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Directly Targeting CX43 and Regulating Mi …
阅读更多 »体内转染与mirRNA-93对小鼠心肌微血管内皮细胞损伤作用研究
心肌炎是一种通常由病毒感染或病毒感染后的免疫反应导致心脏炎症疾病,是导致扩张性心肌病的重要原因。最近的研究也认为心肌炎是导致运动员心脏性猝死(SCD)的主要原因。现分享一篇体内转染mirRNA-93(Entranster)对小鼠心肌微血管内皮细胞损伤作用的研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »Crispr/Cas9腺病毒构建流程
Crispr/Cas9 简介 CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核 …
阅读更多 »Oxidative Medicine and Cellular Longevity | 天津医科大学余剑波教授团队报道:保护肺损伤的新见解
余剑波教授团队在《Oxidative Medicine and Cellular Longevity》期刊发表了题为“Hydromorphone Protects against CO2 Pneumoperitoneum-Induced Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondri …
阅读更多 »体内转染与RNAi诱导的细胞和小鼠基因沉默的光化学调控研究
基于RNA干扰(RNAi)的基因治疗是一种有吸引力的序列特异性基因沉默方法,可用于治疗严重的人类疾病,包括遗传疾病、病毒感染和癌症。Patisiran是FDA批准的第一种基于RNAi的核酸药物,于2018年批准用于治疗遗传性转甲状腺素介导的淀粉样变性的多发性神经病。然而,siRNA药物仍存在一些尚未解决的问题,包括血清稳定性、免疫应答、靶向效应 …
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »测定病毒滴度时,是使用 HEK293 细胞,还是用目的细胞?
测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞测 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享